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目的 采用荧光标记mRNA差异显示技术，将胃癌组织、正常胃黏膜及胃癌前病变的基因表达进行比较，找出与人胃癌密切相关的基因片段，为进一步探讨胃癌的发生机制、胃癌的早期诊断和治疗方案的制定提供重要的理论根据。 方法 收集40例患者的胃镜活检标本，其中30例为胃癌患者，10例为胃癌前病变(中-重度慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生和不典型增生)患者。胃癌患者除取癌组织作为胃癌组标本外，还取其相应的正常胃黏膜组织作为正常对照组标本，癌前病变患者取其组织作为胃癌前病变组标本，所有标本均经病理诊断。分别提取标本组织中的总RNA，每组选取3例标本进行差异显示逆转录PCR，扩增产物经电泳分析，分离差异表达的基因片段，进行再扩增。将再扩增的基因片段克隆后测序，结果提交GenBank经BLAST软件检索，进行同源性比较。应用Northern杂交验证基因的差异表达，通过RT-PCR分析MRP-1／CD9基因在正常及不同病理状态下表达的情况。 结果 从变性聚丙烯酰胺凝胶切取了15个有差异表达特征的凝胶条带，再扩增后选取7个片段克隆后测序，分别编号为：8201、8202、8206、1709、820E、820D、820J，其中8202所测的两个重组质粒为两个不同的序列，分别编号为8202-1、8202-2。1709与编码核糖体蛋白S24的基因有99％的同源性，它在胃癌组织中高表达。在胃癌及胃癌前病变中高表达的8202-1、8202-2和8206均与已知序列同源，但功能未知。在胃癌中低表达的2个序列片段中，8201与编码运动相关蛋白的MRP-1／CD9基因同源性达100％，而820E未检索到与之高度同源的序列，有可能是新的序列片段。在胃癌及其癌前病变中低表达的天津医科大学硕士学位论文82叮和820D测序结果为同一序列，亦未检索到与之高度同源的序列，有可能是新的序歹，」片段。Northern杂交验证820D(820))、820E差异片段的表达，结果显示杂交信号与n1RNA差异显示凝胶电泳的结果一致。RT一PCR的半定量分析发现M卫P一1/C Dg基因在胃癌组织中表达明显低于正常胃私膜及癌前病变组织，其中5例胃癌M卫P一1/C Dg mRNA完全丢失，差异有显著性(P<0.05);不同组织学分型的胃癌中，M吸P一l/C Dg在弥漫型胃癌中的表达明显低于肠型胃癌，差异有显著性(P<。仍)o结论 本研究发现了七个在胃癌、癌前病变及正常胃粘膜中差异表达的基因片段，推测其可能与胃癌的发生、发展过程有关。其中三个与已知序列有高度同源性，但其具体功能未知，另两个差异片段未发现与之高度同源的序列，可能是未报道过的新序列片段。MRP一1/C Dg基因的表达降低或丧失可能与胃癌的发生、恶性进展及转移有关，是早期发生转移和预后较差的表现之一，可做为胃癌发生、发展过程中的一项检测指标，有助于对肿瘤生物学特征作出准确的判断，对于胃癌治疗方案的制定和预后有重要的参考价值。编码核糖体蛋白524的基因可能与胃癌的发生、发展相关。