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第一章C18-鞘糖脂在胶质瘤组织中表达研究。目的：寻找在胶质瘤组织样本中的异常表达的鞘糖脂并鉴定其具体结构。方法：(1)采用线性离子阱质谱获得胶质瘤组织样本中中性鞘糖脂的表达谱，寻找胶质瘤特异性差异表达的中性鞘糖脂；(2)采用多级质谱技术分析鉴定胶质瘤特异性差异表达的中性鞘糖脂的具体结构。结果：(1)质谱初步表征结果显示C18-鞘糖脂在胶质瘤组织样本中显著高表达；(2)多级质谱分析结果显示具有差异表达的中性鞘糖脂主要是以C18-GlcCer、C18-LacCer、C18-Gb3、C18-Gb4等一系列含有C18-神经酰胺（d18:1/18:0）的鞘糖脂为主。结论： C18-脂肪酸链的鞘糖脂在胶质瘤组织样本中高表达第二章胶质瘤组织中高表达C18-鞘糖脂与胶质瘤的肿瘤耐药相关目的：研究胶质瘤组织中高表达C18-鞘糖脂与胶质瘤肿瘤耐药的相关性，从细胞、鞘糖脂、基因等水平探讨胶质瘤细胞系中异常高表达C18-鞘糖脂与胶质瘤的肿瘤耐药的关系，从而探讨C18-鞘糖脂与胶质瘤肿瘤耐药的相关性。方法：(1)筛选胶质瘤细胞系，寻找具有差异表达C18-鞘糖脂的胶质瘤细胞系来研究C18-鞘糖脂的功能，并用MTT方法检测替尼泊苷对不同C18-鞘糖脂表达水平的胶质瘤细胞系杀伤作用；(2)采用药物梯度培养的方法，体外建立胶质瘤耐药细胞系，研究其C18-鞘糖脂在胶质瘤细胞耐药前后表达变化及相关耐药基因MDR1及MRP1的变化；(3)采用siRNA的方法，沉默C18-神经酰胺合成酶LASS1(CerS1)，检测基因沉默前后耐药情况和C18-鞘糖脂表达情况的变化；(4)采用real-time PCR和免疫组化方法检测耐药胶质瘤组织及细胞系中的LASS1(CerS1)的表达水平。结果：(1) MTT结果显示，替尼泊苷对表达不同C18-鞘糖脂水平的胶质瘤细胞系杀伤水平不同：C18-鞘糖脂表达高的A172细胞系对替尼泊苷不敏感（IC50约在10μmol/L），而对C18-鞘糖脂表达量低的U251细胞系对替尼泊苷较敏感（IC50约在0.4μmol/L）；(2) U251细胞系经体外梯度培养替尼泊苷后，其IC50从0.4μmol/L上升到25μmol/L，其耐药相关基因MDR1、MRP1基因的表达水平均上升；同时质谱结果显示：耐药后的胶质瘤细胞系较耐药前C18-鞘糖脂的表达量上升，特别是C18-Gb4显著性上升；(3)基因沉默LASS1(CerS1)后，其IC50没有发生显著差异，其C18游离神经酰胺及C18-鞘糖脂表达水平也没有发生显著改变；(4) real-timePCR及免疫组化结果均显示诱导耐药的细胞系及胶质瘤组织样本中LASS1(CerS1)的高表达，但其下游的C18游离神经酰胺却无显著变化。结论： C18-鞘糖脂的高表达与胶质瘤的药物耐药正相关，C18-鞘糖脂可能参与抑制机体胶质瘤的多药耐药反应，进一步证实了鞘糖脂与肿瘤的多药耐药的关系。