褐腐病是一种由褐腐菌导致的核果类果树如桃、杏、李等,花、叶果实腐烂的果树病害。课题组在前期的研究中发现,对于桃褐腐菌的抑制效果,小檗碱表现出良好的抑制效果,与传统的化学合成农药相比,由于它是从植物中的提取物,因此对人体安全,环境友好。通常,为了防止微生物产生抗药性,人们在防治植物病害时将农药混合使用。在本研究中,将小檗碱与低毒,环境友好的药物混合使用研究,包括绿僵菌,苦参碱,活性蛋白,枯草芽孢杆菌和藜芦碱。本文采用了共毒因子法来评价上述不同农药和化学物质的组合对于桃褐腐菌菌丝生长的影响。简言之,通过测量菌落直径并计算毒力系数得到计算公式并计算结果。结果表明,绿僵菌和枯草芽孢杆菌可以完全抑制桃褐腐菌的生长。除此之外,小檗碱与活性蛋白复配比为5:1时,抑菌率出现了下降,而当复配比为2:1,1:1,1:2或者1:5时,则二者表现出协同效果。另外,当小檗碱与藜芦碱比例为5:1和2:1时,表现出拮抗作用;当比例为1:1,1:2或1:5则表现出相反的协同抑制作用。另外,为了揭示小檗碱对于桃褐腐菌作用靶点,本文成功设计合成了小檗碱光亲和标记探针。在此探针中,以小檗碱为活性基团、三氟苯甲基双吖丙啶为光亲和基团,生物素为报告基团。基于目前合成的方法筛选和反应条件优化,本课题全面研究了小檗碱分子的修饰、偶氮环的合成以及探针中其他基团的反应条件。这种新合成的探针可应用于小檗碱在桃褐腐菌中与作用位点的结合或者与以外位点的作用。同时,这项工作为接下来的研究提供了研究基础。