【摘 要】
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月季(Rosa Chinensis)是多年生生长的常绿灌木,是深受人们喜爱观赏花卉之一。月季具有花色多样、香味浓郁、花型丰富多彩、花期较久等特点,当外在条件适宜时,可一年四季开花,其抗逆性较强,月季自古以来深受大众的喜爱,在其在人们的生活工作中都扮有十分重要的作用,在市场需求中具有一定的买卖商业价值和科研价值,越来越受人们的关注。本试验对两种现代流行的月季品种进行了快繁体系的建立,将该快繁体系应用
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月季(Rosa Chinensis)是多年生生长的常绿灌木,是深受人们喜爱观赏花卉之一。月季具有花色多样、香味浓郁、花型丰富多彩、花期较久等特点,当外在条件适宜时,可一年四季开花,其抗逆性较强,月季自古以来深受大众的喜爱,在其在人们的生活工作中都扮有十分重要的作用,在市场需求中具有一定的买卖商业价值和科研价值,越来越受人们的关注。本试验对两种现代流行的月季品种进行了快繁体系的建立,将该快繁体系应用到其余3个品种以获得大量无毒苗后,其中以月季的叶脉、叶片为外植体,对月季体细胞胚的发生和再生体系的构建进行了系统的完善。为更快、更好构建月季快繁体系和再生体系提供了更多的理论基础。本试验的研究结果主要如下:1.月季快速繁殖体系的构建本试验选用现代月季品种‘小玫瑰’、‘蓝色风暴’为实验材料,腋芽的繁殖速度与生长状态不仅取决于试验材料的基因型,还受外植体类型的影响,在实验操作过程中外植体的消毒时间和培养基中激素种类及浓度配比都是影响快繁苗生长过程中重要的影响因子。以‘仙容’、‘蓝色风暴’的枝条带芽的茎段为外植体,进行植物组织培养,对其组织培养过程中的外植体消毒、初代培养、继代培养、生根培养与炼苗培养等必要环节都进行了试验探究,筛选出最优培养基配方。试验研究结果表明:‘小玫瑰’、‘蓝色风暴’均在MS+1.0mg/L 6-BA+0.01mg/L NAA+0.1mg/L GA3+30g/L Sucrose+7.5g/L Agar+1mg/L ZPL的快速增殖培养基上增殖效果最好,快繁苗的长势健壮,大大提高了外植体的成苗率。2.月季再生体系构建的初步探究选择两种现代月季品种‘小玫瑰’、‘薰衣草花环’,实验选取‘小玫瑰’、‘薰衣草花环’的叶片、叶柄作为外植体来诱导月季的愈伤组织,对‘小玫瑰’、‘薰衣草花环’再生体系进行初步探究。在经过一系列的实验操作之后:培养基中激素的种类及浓度配比对月季体细胞胚的诱导及萌发出完整再生植株都具有重要影响,同时‘小玫瑰’、‘薰衣草花环’的外植体部位的选择和日常光照条件也具有重要作用。在暗培养条件下,用小玫瑰和薰衣草花环两种月季的复叶柄在MS培养基上,分别添加了植物激素5.0mg/L 2,4-D和添加剂10mg/L Ag NO3、400mg/L L-p,在此培养基上愈伤组织的诱导结果可观。具体分别达81.6%和74.25%,两周后移至到MS培养基,另添加适量激素6-BA和NAA,在此培养基上光照培养,每四周继代一次,12周之后愈伤的长势翠绿壮实,但均没有体细胞胚的产生。紧接着用四种月季品种‘小玫瑰’、‘薰衣草花环’、‘紫精灵’、‘大地之蓝’组培苗的叶脉做外植体,在培养基MS+5.0mg/L 2,4-D+10mg/L Ag NO3+400mg/L L-p+30g/L Glucose+3.0g/L GEL中先暗条件下培养一周,然后光下再培养两周,然后再移至培养基MS+1.0mg/L TDZ+0.01mg/L NAA+0.1mg/L GA3+30g/L Glucose+3.0g/L GEL中光下培养,四周后,只有‘小玫瑰’和‘大地之蓝’的愈伤组织有胚性愈伤组织的产生,诱导率分别为16.67%和29.20%。‘小玫瑰’和‘大地之蓝’产生的胚性愈伤组织及体细胞胚在培养基1/2MS+1.0mg/L 6-BA+0.01mg/L NAA+30g/L Glucose+3.0g/L GEL可快速萌芽,全部萌芽,4周后萌发成苗后,转入MS培养基,培养基成分含有0.5mg/L 6-BA、0.01mg/L NAA和0.1mg/L GA3,中光下培养一段时间,待再生苗长至4-5cm株高,然后将再生苗接种到含0.5mg/L IBA的1/2MS生根培养基上,可顺利生根,生根率达100%。
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