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目的探讨胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)在醛固酮诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中的作用。方法1.采用改良组织块贴壁法原代培养大鼠VSMC,以倒置显微镜观察细胞形态结合免疫组织化学染色法鉴定。2.WST-1法检测醛固酮(不同浓度、孵化时间)及MR拮抗剂、IGF-1R拮抗剂对VSMC增殖的影响。3.RT-PCR法检测大鼠VSMC中IGF-1RmRNA表达水平,醛固酮(不同浓度、孵化时间)及MR拮抗剂、IGF-1R拮抗剂处理对其影响。4.Western blot法检测大鼠VSMC中IGF-1RP蛋白表达水平,醛固酮及MR拮抗剂、IGF-1R拮抗剂处理对其影响。结果1.原代培养第5天后组织块周围VSMC游出,呈特征性“峰谷”状生长,胞浆内出现纵向平行肌丝,α-肌动蛋白免疫化学染色呈阳性(棕色)。2.WST-1法检测：0.1%酒精、(10-10、10-9、10-8、10-7、10-6)mol/l醛固酮孵化VSMC 24 h,相应的细胞增殖水平经WST-1吸光度比值计算后依次为(100±17.62)%、(107±8.32)%、(115±17.62)%、(119±14.33)%、(128±17.34)%、(121±16.52)%。结果显示10-9-10-6mol/l醛固酮组较对照组WST-1吸光度比值显著增高(P<0.05)。用0.1%酒精、10"7mol/l醛固酮、100ng/ml IGF-1处理VSMC 24 h,10-5mol/l PQ401或10-5mol/l螺内酯预处理30min后10"7mol/l醛固酮孵化24 h,相应的细胞增殖水平经吸光度比值计算后依次为(100±17.62)%、(128±17.34)%、(122±16.10)%、(104±9.46)%、(107±2.00)%,醛固酮组和IGF-1组较对照组WST-1吸光度比值显著增高(P<0.05)。PQ401组和螺内酯组较醛固酮组WST-1吸光度比值显著下降(P<0.05)。3.PCR法检测：以IGF-1R/GAPDH光密度比值表示相应的IGF-1RmRNA表达水平。用0.1%酒精、(10-8、10-7、10-6) mol/1醛固酮孵化VSMC 12h,各组(n=3)IGF-1R/GAPDH光密度比值计算后依次为(0.40±0.15)、(0.48±0.02)、(0.64±0.16)、(0.78±0.16)。10-6mol/l醛固酮组较对照组光密度比值显著增高(P<0.05)。用10-6mol/l醛固酮孵化VSMC 0、4、8、12 h,各组(n=3)IGF-1R/GAPDH光密度比值计算后依次为(0.35±0.25)、(0.52±0.13)、(0.92±0.12)、(0.70±0.24)。8 h醛固酮组较对照组光密度比值显著增高(P<0.05)。以0.1%酒精、10"6mol/l醛固酮孵化VSMC 8 h,10-5mol/l PQ401或10-5mol/l螺内酯预处理30min后10-6mol/l醛固酮孵化8 h,醛固酮组(0.71±0.11)较对照组(0.40±0.11)比值显著增高(P<0.05)。PQ401组(0.32±0.06)和螺内酯组(0.21±0.07)较醛固酮组(0.71±0.11)比值显著下降(P<0.05)。4.Western blot检测：以IGF-1Rβ/β-actin光密度比值表示相应的IGF-1Rβ蛋白表达水平。用0.1%酒精、10"6mol/l醛固酮孵化VSMC48 h,计算各组(n=3)IGF-1Rβ/β-actin条带灰度比值,醛固酮组(0.84±0.03)较对照组(0.38±0.01)光密度比值显著增高(P<0.05)。以10-6mol/l醛固酮孵化VSMC 48 h, 10-5mol/l PQ401或10-5mol/l螺内酯预处理30min后10-6mol/l醛固酮孵化48 h,螺内酯组(0.28±0.01)和PQ401组(0.25±0.002)较醛固酮组(0.66±0.03)比值显著下降(P＜0.01)。结论1.改良组织块贴壁法成功培养出原代大鼠VSMC。2.醛固酮对VSMC具有细胞增殖诱导作用,并呈剂量依赖关系。3.PQ401和螺内酯对醛固酮诱导的VSMC增殖有抑制作用。4.醛固酮诱导VSMC的IGF-1R mRNA和IGF-1RP蛋白表达上调。5.PQ401和螺内酯对醛固酮激活的IGF-1R mRNA和IGF-1RP蛋白表达有抑制作用。