成纤维细胞生长因子-8a(Fibroblast Growth Factor-8a, FGF8a)属成纤维细胞生长因子家族成员之一,是胚胎发育阶段必需的细胞调节因子,还具有其它多种生物学功能,比如能够高效安全地促进组织损伤的修复,在神经干细胞培养过程中起重要的营养和诱导作用等,因而有广阔的临床应用前景。本文对比研究rhFGF8a大肠杆菌基因工程菌包涵体表达和可溶性表达的发酵参数及两种表达条件下目标蛋白的纯化方案与活性结果,证实了可溶性表达对提高发酵产率和重组蛋白比活具重要意义。在实现对前期构建的rhFGF8a包涵体表达菌株rhFGF8a-pET-22b(+)-Rosetta(DE3)可溶性诱导表达的基础上,研究了诱导温度、诱导剂浓度、诱导时间、诱导时期(OD600)、培养基类型等五种因素对可溶性表达的影响。优化表达条件后实现可溶表达率>30%。对以包涵体形式和可溶性形式表达的rhFGF8a目标蛋白分别进行了以层析方法为主的分离、纯化研究,实现了对重组蛋白rhFGF8a的高效分离纯化,纯度>90%。细胞学活性检测证实纯化的rhFGF8a蛋白能显著刺激成纤维细胞生长,可溶性形式表达的rhFGF8a蛋白活性高于包涵体形式表达的蛋白活性。本研究获得的rhFGF8a蛋白可溶性表达条件及其分离纯化方案不仅为rhFGF8a蛋白的后续研究和中试研究奠定了基础,而且也为其它同类成纤维细胞生长因子家族成员的表达纯化提供了参考。