【摘 要】
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目的:探究子痫前期（Preeclampsia,PE）胎盘组织长链非编码RNA（Long noncoding RNAs,lncRNAs）的差异表达,并对子痫前期胎盘中高表达的lncRNA MIR210HG的作用机制进行探究,为PE的发生发展提供新的视角。方法:（1）采用RNA-seq技术分析子痫前期和正常妊娠的胎盘组织的差异表达lncRNAs。（2）实时荧光定量PCR方法验证lncRNA MIR21
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目的:探究子痫前期（Preeclampsia,PE）胎盘组织长链非编码RNA（Long noncoding RNAs,lncRNAs）的差异表达,并对子痫前期胎盘中高表达的lncRNA MIR210HG的作用机制进行探究,为PE的发生发展提供新的视角。方法:（1）采用RNA-seq技术分析子痫前期和正常妊娠的胎盘组织的差异表达lncRNAs。（2）实时荧光定量PCR方法验证lncRNA MIR210HG在子痫前期组和正常对照组的胎盘组织中的表达水平,并分析MIR210HG的表达水平与临床指标的相关性。（3）进行体外细胞增殖和迁移实验,探究MIR210HG对人绒毛外滋养层细胞株HTR8/Svneo和血管内皮细胞株Eahy的作用。（4）利用生物信息学方法预测MIR210HG的作用途径。（5）利用小干扰RNA（si RNA）下调MIR210HG,通过实时荧光定量PCR和Western blot方法检测HTR8/Svneo中肾素-血管紧张素系统（RAS）关键基因的变化。结果:（1）RNA-seq获得具有显著差异表达的lncRNAs共26个,其中上调lncRNAs 21个,下调lncRNAs 5个。（2）RT-PCR结果显示,子痫前期的胎盘组织MIR210HG表达水平上调。收缩压、舒张压与MIR210HG的表达水平成线性正相关,新生儿出生体重与其成线性负相关（P<0.05）,而分娩前BMI（P=0.0582）、分娩前血肌酐水平（P=0.6522）、分娩前白蛋白水平（P=0.6522）及分娩前血小板水平（P=0.2000）与MIR210HG表达水平无显著相关性。（3）体外实验显示,利用si RNA敲低MIR210HG后HTR8/SVneo和Eahy细胞的增殖和迁移能力增强（P<0.05）。（4）MIR210HG通路富集分析显示,Gene Ontology（GO）分析富集于免疫反应分子介质产生调节等27条通路,Kyoto Encyclopedia of Gene and Genomes（KEGG）富集于同种异体移植物排斥等8条通路,Bio Carta富集于翻译起始因子通路等8条通路;与MIR210HG结合RNA预测结果显示,有38个RNA与MIR210HG存在相互作用,包括24个为m RNA和3个r RNA。（5）下调HTR8/SVneo细胞的MIR210HG表达水平后,血管内皮生长因子（VEGF）在m RNA水平和蛋白水平表达均升高（P<0.05）,血管紧张素转换酶1（ACE1）、肾素（REN）、ATP酶H+转运副蛋白2（ATP6AP2）、血管紧张素II1型受体（AGTR1）和血管紧张素原（AGT）基因无明显变化。结论:（1）MIR210HG在子痫前期胎盘组织中的表达升高;（2）MIR210HG的水平与PE严重程度可能存在相关性;（3）MIR210HG作为负性调节因子,在滋养细胞和内皮细胞的增殖和迁移过程中发挥作用;（4）MIR210HG可能通过影响滋养层细胞的RAS关键基因中的VEGF水平,参与滋养细胞的生物学行为。
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