日本沼虾肝胰腺碱性磷酸酶的纯化及特性研究

来源 :河北大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tjbxgb123
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
从白洋淀日本沼虾肝胰腺中提取的碱性磷酸酶,经正丁醇抽提、硫酸铵分级沉淀,0.15%NaCl溶液透析,得粗酶液。分别用Sephadex G-200葡聚糖层析柱、CM-纤维素层析柱、DEAE-纤维素层析柱纯化粗酶,结果表明DEAE-纤维素柱层析效果最好。 以对硝基苯磷酸二钠(PNPP)为底物,测定提纯后酶的理化性质,结果表明:该酶的最适pH值为8.5,最适温度为45℃,Km值为2.8×10-3mol/L。Mg2+、Mn2+、Zn2+对酶有明显的激活作用,而Cu2+则表现出抑制作用。甲醛、乙醇、甲醇、Vc、草酸、酒石酸对碱性磷酸酶均有抑制作用。 在一定条件下分别采用苯甲基磺酰氟(PMSF)、N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)、一氯乙酸、乙酚丙酮、巯基乙醇、甲醛等化学修饰剂选择修饰日本沼虾碱性磷酸酶的多种氨基酸残基,并测定其酶活力变化。结果表明,巯基乙醇、甲醛、一氯乙酸能显著抑制酶的活力,活力的下降与修饰剂的浓度相关;PMSF也能抑制酶的活力,活力的下降与修饰时间相关;乙酰丙酮、NBS的修饰不表现对酶的抑制作用。因此认为Lys、Ser、His残基是日本沼虾肝胰腺碱性磷酸酶的必需功能基团,部分二硫键对保护酶的催化功能也是必需的。
其他文献
目的:观察循环辅助支持治疗在心原性休克患者中的治疗效果。方法:回顾性分析57例心原性休克患者的临床资料,根据是否进行主动脉内球囊反搏术(IABP)和体外膜肺氧合(ECMO)辅助
编者按$$伟大的事业在承前启后中推进,伟大的目标在接续奋斗中实现。在中国特色社会主义进入新时代的历史节点,党的十九大报告提出“两个阶段”“分两步走”全面建设社会主义现
报纸
为朱顶红盆栽产业发展提供参考,采用温室盆栽试验研究草炭、蛭石、珍珠岩和菇渣4种基质不同配方对朱顶红生长的影响。结果表明:在6个配方基质中,以草炭∶蛭石∶珍珠岩∶菇渣=
柔性电子技术是微电子技术的热门发展方向之一。柔性电子器件柔韧性好、集成度高、可设计性强,因此在很多领域有重要的应用价值。纤维状柔性电子器件由于其独特的性能和在可
书法作为一门历史悠久的艺术,不仅依托文字的形,还通过文字的音、义来传递信息,通过文字的造型来表达作者的审美理想与内心情感。随着时代的变迁,书法的艺术性已逐渐取代其实
本文主要就国内探讨"人择原理"的论著,结合必要的背景,选取、概括部分外推到哲学及基督教神学领域的观点或者研究视角,分别作初步分析,旨在发现一些对话的接触点或思路,并在
目的:探讨太宁乳膏对急性肛裂的治疗作用。方法:将急性肛裂患者随机分为对照组和治疗组各60例,对照组采用常规高锰酸钾溶液、马应龙痔疮栓治疗,治疗组应用太宁乳膏肛门治疗。结果
随着新媒体技术的崛起以及公民记者时代的到来,电视台的竞争愈发激烈。由于受到来自网络媒体、手机媒体等新媒体的冲击,电视媒体作为传统媒体的一员,急需在这种竞争中发挥自