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T细胞非霍奇金淋巴瘤是我国高发的非霍奇金淋巴瘤类型,约占所有非霍奇金淋巴瘤的30%以上。目前,国内外尚缺乏理想的治疗方案,常规应用的CHOP方案(环磷酰胺、阿霉素、长春新碱、泼尼松龙)近期有效率尚可,但远期疗效很差,患者预后不良,生存期较短。因而急需寻找有效的抗癌药物及其联合治疗方案以提高疗效并改善患者的预后。硼替佐米是首个进行临床研究的蛋白酶体抑制剂,已被批准用于治疗多发性骨髓瘤及部分B细胞非霍奇金淋巴瘤的亚型,而对于T细胞淋巴瘤的抗肿瘤作用尚不明确。本实验旨在探讨硼替佐米对T细胞非霍奇金淋巴瘤细胞系Hut-78的体外抗肿瘤效应,同时观察硼替佐米与吡喃阿霉素联合对Hut-78细胞是否具有协同或叠加作用,初步分析序贯给药对细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机理,为确定最佳的治疗方案提供理论依据。方法:1采用MTT比色法分别检测硼替佐米、吡哺阿霉素对人皮肤T细胞淋巴瘤细胞株Hut-78生长的抑制作用。2采用MTT比色法检测硼替佐米与吡哺阿霉素联合对Hut-78细胞增殖的抑制作用,采用中效原则分析药物之间的相互作用。3应用PI染色法分别检测硼替佐米、吡喃阿霉素单药及序贯给药对Hut-78细胞周期的阻滞效应。4应用Annexin-V法分别检测硼替佐米、吡喃阿霉素单药及序贯给药对Hut-78细胞凋亡的影响。结果:1硼替佐米、吡喃阿霉素单药对Hut-78细胞生长的抑制效应。MTT比色法检测结果显示,不同浓度的硼替佐米和吡哺阿霉素单药与Hut-78细胞共培养24h和48h后,能够明显抑制肿瘤细胞增殖,其生长抑制率与药物浓度呈正相关(P<0.01),表明呈剂量依赖性;且48h的抑制率明显高于24h抑制率(P<0.01),表明呈时间依赖性。2硼替佐米与吡喃阿霉素联合不同给药顺序对Hut-78生长抑制的影响。以先吡喃阿霉素后硼替佐米(THP→BTZ),硼替佐米、吡喃阿霉素同时给药(BTZ+THP),先硼替佐米后吡喃阿霉素(BTZ→THP)三种给药方式分别处理Hut-78细胞48h后,结果显示,BTZ→THP、BTZ+THP两种给药顺序均具有协同作用。尤以BTZ→THP组更为显著,随着药物浓度的增加,其效应肿瘤抑制率(fa)逐渐升高,联合指数(CI)值呈降低趋势;BTZ+THP组随浓度增加,其fa逐渐升高,CI值呈升高趋势。而THP→BTZ组仅在一定范围内有协同作用。因此,BTZ→THP的协同作用最佳。3单药硼替佐米以剂量依赖的形式诱导细胞停滞于G2/M期,而单药吡喃阿霉素对细胞周期无明显影响,序贯应用THP可显著增加BTZ所诱导的G2/M期阻滞效应。4流式细胞仪检测表明,硼替佐米、吡喃阿霉素单药均可剂量依赖性地诱导Hut-78细胞凋亡,且BTZ→THP组的细胞凋亡率显著高于硼替佐米或吡喃阿霉素单药治疗组(P<0.01)。结论:硼替佐米与吡喃阿霉素联合体外可有效抑制Hut-78细胞增殖和诱导其凋亡,序贯应用可产生高度协同的细胞毒效应。本研究表明硼替佐米序贯吡喃阿霉素为T细胞非霍奇金淋巴瘤提供了实验依据。