背景与目的：乳腺癌作为女性面临的重大威胁，当今对之采取的主流治疗手段还是以手术为基础的放化疗联合治疗，考虑到其带来的各类严重的副反应或并发症，传统中药以及靶向基因结合治疗越来越为人们所重视和接受。本实验探讨ZIC1基因联合苦参碱对高转移性人乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖能力、黏附能力、迁移能力及凋亡的影响，进而为乳腺癌的治疗探索新思路。　　方法：1.首先将慢病毒载体pLV-Zic1-PGK-puro转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞株，转染48小时后，荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白（GFP）的表达情况，并培养筛选后得到稳定传代的细胞克隆。　　2.以GAPDH作为内参对照，蛋白质印迹法（Western blot法）检测ZIC1基因转染后在MDA-MB-231细胞中的表达。　　3.之后以空载体转染的人乳腺癌 MDA-MB-231细胞及 ZIC1基因稳定转染的细胞作为研究对象进行细胞毒实验。选取50，100，200，400，800mg/L浓度梯度的苦参碱分别作用于空载体组与转染组48h，四甲基唑蓝法（MTT法）分别测量苦参碱对之作用后的生长抑制率，并筛选出苦参碱处理48h的半抑制浓度（IC50）。　　4.以上述48h检测出的IC50为苦参碱后续实验的浓度，把细胞人为地划分为四组，即A空载不加药组（阴性对照组），B空载加药组，C转染不加药组和D转染加药组。对四组细胞分别采用如下：（1）细胞黏附试验及MTT法检测细胞黏附能力，并计算各组细胞的黏附率；（2）细胞划痕/迁移实验检测细胞迁移能力，观察各组细胞在24h，48h，72h下的迁移程度；（3）流式细胞术检测细胞凋亡，分析各组细胞的凋亡率及凋亡分布情况。　　结果：1.携带ZIC1基因的慢病毒载体pLV-Zic1-PGK-puro转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞，ZIC1在细胞中的表达情况：48h荧光显微镜检测到大量绿色荧光蛋白，转染率达90％。　　2.蛋白质印迹结果显示，ZIC1蛋白在稳定转染细胞中均有表达，而在未转染细胞均无表达。　　3.药物的细胞毒实验，经 MTT检测，发现苦参碱对空载及转染的MDA-MB-231细胞均呈现增殖抑制作用，具有剂量依赖性。其中，浓度为200mg/L的苦参碱作用于空载细胞、转染细胞48h后细胞增殖抑制率分别为49.21%和52.42%左右，抑制率最接近50%。于是我们选取200mg/L浓度的苦参碱，作为后续的标准实验浓度。　　4.在细胞黏附实验中，MTT测得200mg/L苦参碱处理各组细胞48h后，转染不加药组（64.13%）和空载加药组（49.17%）的细胞黏附率均低于阴性对照组，而转染加药组细胞的黏附率约为31.23%，均明显低于其余三组（P<0.05）；在细胞迁移实验中，随时间的延长每组细胞迁移的距离逐渐增大，即具有时效性，并且同一时间段的MDA-MB-231细胞迁移的距离，以转染加药组迁移距离最短，相对迁移率最低（ P<0.05）；在细胞凋亡实验中，48h的凋亡率以转染加药组细胞最高，为34.78%±1.82，其次为空载加药组（26.3%±1.28）和转染不加药组（24.24%±1.14），最低为阴性对照组（7.99%±1.07）。　　结论：　　1.包裹ZIC1基因的慢病毒载体pLV-Zic1-PGK-puro稳定转染的乳腺癌MDA-MB-231细胞中ZIC1的表达较慢病毒空质粒转染细胞中的表达明显增强。　　2.苦参碱作用转染细胞或空载细胞48小时的50%抑制浓度（IC50）约为200mg/L。　　3. ZIC1基因表达上调或苦参碱单独作用均可以明显抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖、黏附与迁移，并诱导该细胞的凋亡。　　4. ZIC1基因与苦参碱联合作用抗肿瘤效果更为明显，能发挥很好的抗MDA-MB-231细胞生长、迁移及促凋亡的作用。　　因此，可以认为中药苦参碱联合ZIC1基因靶向治疗可能对乳腺癌发挥协同抑制作用，推测它们结合会产生比较理想的抗肿瘤治疗成效。