壳聚糖及其复配物对几种重要园艺作物病原细菌的抑菌活性及其机制研究

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壳聚糖是一种广谱的天然活性抑菌物质。本次试验用12株从一品红上分离到的不同地理型的油菜黄单胞杆菌致病菌株来调查两种酸溶性壳聚糖[壳聚糖A(脱乙酰度>85%)和壳聚糖B(脱乙酰度>75%)]的抗菌活性及抑菌机制。试验结果显示,通过菌悬液OD600值测定表明两种壳聚糖都显著地抑制了黄单胞致病菌的生长。经过两种壳聚糖处理的菌悬液,OD260值增加,表明受试菌株DNA和RNA泄漏增加。除了壳聚糖A在浓度为0.1mg/mL处理0.5h和浓度为0.2mg/mL处理2.0h受试菌悬液OD280值增加以外,两种壳聚糖处理均会引起受试菌悬液OD280值降低,表明两种壳聚糖溶液处理会引起黄单胞致病菌胞内蛋白质分泌受阻。试验结果显示,壳聚糖与细菌细胞膜之间有着复杂的相互作用,这种作用受到处理时长、菌株种类、壳聚糖类型和壳聚糖浓度的影响。透射电镜照片显示,壳聚糖处理引起了细菌原生质体的浓缩和细胞表面形态的改变。一些细菌细胞膜和细胞壁严重扭曲变形甚至破裂,而另有一些细菌细胞被一层致密厚壁的带状层所包裹。细胞形态两种不同的改变解释了壳聚糖对DNA、RNA、蛋白质释放造成的不同影响。此外,扫描电镜照片和生物膜形成测试表明两种壳聚糖能引起生物膜的剥落。总而言之,壳聚糖对于致病细菌细胞膜及生物膜的破坏在其抑菌机制中扮演着重要的角色。壳聚糖与其他物质联合作用可以扩展壳聚糖的使用领域,也可提高壳聚糖在特定方面的功用。本次试验将壳聚糖与其它具有一定抑菌能力的物质联合使用,在壳聚糖与抑菌物浓度皆极低的情况下,对引起瓜类细菌性果斑病的类产碱假单胞菌西瓜亚种有着良好的抑制作用。在戊二醛、CTAB、DDAB、氯化铵浓度分别在0.02%、1mg/L、10mg/L、0.5mg/L的情况下,与浓度为0.1mg/mL的壳聚糖溶液联合抑菌,抑菌率均在90%以上。试验结果表明,L述四种具有抑菌能力的化学物质与壳聚糖联合作用,能在低浓度条件下显示出优异的抑菌能力,证实联合抑菌不失为一种高效、低耗的模式。
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