硬脑膜重建的实验性研究

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目前用于研究硬脑膜重建的模型并不多,大多数集中在动物的体内模型,Schick于2003年首次报道了体外成功培养小猪的硬脑膜,建立了硬脑膜缺损的体外模型,以观察硬脑膜缺损的愈合情况及细胞外基质、细胞因子等因素对硬膜愈合的影响,试图揭示硬脑膜的愈合机制.Tachibana等在硬脑膜重建的大鼠动物模型中发现自体筋膜重建硬脑膜的部位局部有bFGF表达的增强,推测bFGF可能在自体筋膜硬脑膜重建后的愈合过程中发挥重要作用.本课题采用2月龄大耳白兔作为实验动物,取其硬脑膜制作硬脑膜缺损体外培养模型,了解不同细胞外基质如胶原、多聚赖氨酸、层粘连蛋白对硬脑膜细胞逸出的影响,分析硬脑膜缺损后的愈合机制,并探讨bFGF等细胞因子对这一过程的影响.这一模型的建立不仅为研究硬脑膜的愈合机制提供了一个新的途径,还能够为体外检测各种硬脑膜替代物的特性提供方便.自体筋膜作为硬脑膜替代材料的"金标准",仍然是目前临床上硬脑膜重建的首选材料,本课题还通过自体筋膜硬脑膜重建的大鼠动物模型,观察自体筋膜重建硬脑膜的愈合过程及bFGF等细胞因子在其中的作用,并探讨外源性bFGF对自体筋膜重建硬脑膜愈合过程的影响,从而为临床进一步的研究提供实验依据.第一章:兔硬脑膜缺损体外培养模型的建立.本实验首先建立兔硬脑膜缺损的体外培养模型,观察不同细胞外基质一胶原、多聚赖氨酸及层粘连蛋白对硬脑膜体外培养的影响;免疫细胞化学方法鉴定硬脑膜边缘逸出细胞;超微结构观察硬脑膜缺损的愈合过程.第二章:生长因子bFGF、EGF、TGF-β<,1>对体外培养缺损硬脑膜愈合过程的影响.本实验在硬脑膜缺损体外培养模型的基础上,观察不同生长因子对其愈合过挥的影响.第三章:自体筋膜重建硬脑膜的动物实验研究.采用SD大鼠动物模型,观察自体筋膜硬脑膜重建的愈合过程及bFGF在其中的作用;并探讨外源性bFGF对自体筋膜重建硬脑膜愈合过程的影响.
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