大豆、菠菜实和芫荽实对雄性大鼠性功能的影响及其机制研究

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目的:研究大豆、菠菜实和芫荽实对雄性大鼠性功能的影响,并探讨其作用机制。方法:(1)选取60只正常的SD(Sprag-Dawley,SD)雄性大鼠,随机选取分为正常对照组(N组)、大豆组(A组)、菠菜实组(B组)、芫荽实组(C组)、已烯雌酚对照组(D组),每组12只。分别以含大豆、菠菜实、芫荽实特殊饲料干预雄性大鼠,阳性对照组以已烯雌酚灌胃。定期观察大鼠行为状态,每4周1次动态检测性行为能力的改变。干预20周后取材,称取各组大鼠睾丸重量,并计算睾丸系数。光镜下观察各组大鼠的睾丸形态学变化。(2)采用放射免疫法检测各组大鼠血清睾酮(Testosterone,T)、雌二醇(Estradiol,E2)、黄体生成素(Luteinizing hormone,LH)、卵泡刺激素(Follicle-stimulating hormone,FSH)、催乳素(Prolactin,PRL)5种性腺轴激素水平。免疫组织化学及免疫印迹(Western-blot)方法检测各组大鼠睾丸组织中ERα、ERβ蛋白表达。结果:(1)性行为学实验结果:与N组相比,C组大鼠爬背潜伏期第12、16周均显著延长,D组大鼠爬背潜伏期第8、12、16、20周均显著延长(P<0.05);C、D组插入潜伏期、射精潜伏期第8、12、16、20周均显著延长(P<0.05)。与N组相比,C、D组大鼠爬背次数第4、8、12、16、20周均显著减少(P<0.05);C、D组大鼠插入、射精次数第8、12、16、20周均减显著少(P<0.05)。与A组相比,C组大鼠爬背潜伏期第16周显著延长(P<0.05);C组大鼠射精潜伏期第16、20周均显著延长(P<0.05);D组大鼠爬背、插入、射精潜伏期第8、12、16、20周均显著延长(P<0.05)。与A组相比,C组大鼠插入次数第16周显著减少(P<0.05);D组大鼠爬背、插入、射精次数第8、12、16、20周均显著减少(P<0.05)。与B组相比,D组大鼠爬背潜伏期第12、16周均显著延长(P<0.05);D组大鼠插入、射精潜伏期第12、16、20周均显著延长(P<0.05)。与B组相比,D组大鼠爬背次数第12、16周均显著减少(P<0.05);D组大鼠插入次数第8、12、16周均显著减少(P<0.05);D组大鼠射精次数第8、12、16、20周均显著减少(P<0.05)。(2)大鼠体重、睾丸重量及睾丸系数结果:不同饲料干预各组大鼠后,与N组相比,B、C组大鼠体重均显著增加(P<0.05)。与N、A、B、C组相比,D组大鼠体重、睾丸重量和睾丸系数均显著降低(P<0.05)。(3)睾丸HE染色结果:光镜下可N组大鼠睾丸形态结构正常,间质细胞丰富;A、B组大鼠睾丸间质细胞减少,有少量毛细血管充血;C、D组大鼠睾丸间质细胞显著减少,睾丸正常形态破坏较为严重。(4)性激素水平检测结果:T水平,与N组相比,C、D组T水平均显著降低(P<0.05)。与A、B、C组相比,D组T水平均显著降低(P<0.05)。E2水平,与N、A组相比,C组E2水平均显著升高,(P<0.05)。LH水平,与N、D组相比,C组LH水平均显著降低(P<0.05)。PRL水平,与N、C组相比,D组PRL水平显著降低(P<0.05)。(5)免疫组化和Western blot检测结果显示,光镜下可见,ERα和ERβ两种受体均在生精小管之间的睾丸间质细胞及精原细胞的细胞核中强表达,胞浆弱表达。与N组相比,B、C组大鼠睾丸组织中ERα蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。与A组相比,C组大鼠睾丸组织中ERα蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与N、A、B、C组相比,D组ERβ蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。结论:(1)芫荽实可通过延长大鼠爬背、插入、射精潜伏期和减少其爬背、插入和射精次数,导致性功能减退,并诱发大鼠性功能障碍。具体机制可能和升高血清中E2水平,降低LH水平,并增加睾丸间质中ERα的表达,降低血清T水平有关。提示,芫荽实属于内分泌干扰物,可在雄性大鼠体内发挥雌激素样作用。(2)菠菜实可显著上调雄性大鼠睾丸ERα的表达,提示,其可抑制睾丸间质细胞T的合成和分泌,但对性功能的影响可能存在剂量依赖性。(3)大豆对雄性大鼠性功能、性腺轴激素和睾丸雌激素受体表达没有显著的影响,可能与其剂量和时间依赖性有关。(4)已烯雌酚损伤雄性大鼠性功能,具体机制可能与下调睾丸ERβ的表达,降低T的合成和分泌有关。
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