论文部分内容阅读
本文以水稻白叶枯菌、金黄色葡萄球菌、小麦赤霉菌和苹果炭疽菌等为供试菌种,筛选、评价了30种竹叶提取物的抑菌活性;采用液液萃取、柱层析技术,对孝顺竹竹叶提取物进行了初步分离,测定了分离流份的抑菌活性。主要结果如下:1.以水稻白叶枯菌、金黄色葡萄球菌为供试菌种,采用抑菌圈法,筛选了30种竹叶提取物抗细菌活性,结果表明,在0.02g(竹叶)/纸碟的剂量下,红竹和月月竹对水稻白叶枯菌抑制效果最明显,24h抑菌圈直径分别为21.81mm和19.84mm;桂竹、金镶玉竹和红竹对金黄色葡萄球菌抑制效果最明显,24h抑菌圈直径分别为18.33mm、18.27mm和18.02mm。以小麦赤霉菌、苹果炭疽菌为供试菌种,采用生长速率法,测定了30种竹叶提取物的抗真菌活性,结果表明,在40g(竹叶)/L的浓度下,长叶苦竹、铁竹、桂竹、孝顺竹、毛竹和苦竹等6种竹叶对小麦赤霉菌的抑制效果最明显,48h菌丝抑制率都在70%以上,长叶苦竹、铁竹、孝顺竹和毛竹等4种竹叶对苹果炭疽菌的抑制效果最明显,48h菌丝抑制率都在75%以上。2.选用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇对孝顺竹竹叶提取物的水溶液进行萃取,得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水相4个萃取组分,分别用2种细菌和3种真菌对其进行抑菌活性测定,结果表明,乙酸乙酯相对5种供试菌种抑制效果最好,在0.0005g(提取物)/纸碟的剂量下,对水稻白叶枯菌、金黄色葡萄球菌的24h抑菌圈直径分别为18.13mm、13.98mm;对小麦赤霉菌、苹果炭疽菌、番茄枯萎菌的48hEC50分别为1.5499g/L(0.6617g/L-3.5842g/L)、2.3719g/L(2.1102g/L-2.6410g/L)、1.7709g/L(0.9610g/L-3.2252g/L)。正丁醇相次之,石油醚相和水相抑菌效果最弱。3.孝顺竹竹叶提取物石油醚相和乙酸乙酯相经聚酰胺柱层析分离,以氯仿和甲醇为淋洗剂,经梯度洗脱,分别得到12和16个流份。孝顺竹竹叶提取物正丁醇相和水相经AB-8大孔树脂柱层析分离,以水和乙醇为淋洗剂,经梯度洗脱,分别得到6和5个流份。抑菌活性测定结果表明,乙酸乙酯相的F2-4、F2-5、F3-2、F8流份和正丁醇相的F5流份对5种供试菌种抑制效果较好,其中乙酸乙酯相的F3-2流份活性最高,在0.00025g(提取物)/纸碟的剂量下,对水稻白叶枯菌、金黄色葡萄球菌的24h抑菌圈直径分别为20.30mm、13.43mm;对小麦赤霉菌、苹果炭疽菌、番茄枯萎菌的48hEC50分别为0.9594g/L(0.4735g/L-1.9400g/L)、0.8341g/L(0.4718g/L-1.4737g/L)、0.7647g/L(0.3433g/L-1.7047g/L)。4.乙酸乙酯相F3-2流份经LC-MS和GC-MS分析,初步判定孝顺竹竹叶提取物中抑菌活性成分为苯酚类似物,推断对羟基肉桂酸是抑菌活性物质之一。