酒精性脂肪肝是脂肪肝的一种,是最常见的弥漫性肝病之一,其以肝细胞内甘油三酯蓄积过多为主要病理改变。近年来由于人均饮酒量的逐年递增,肝脏的受损首当其冲,加上医学影像检查技术的提高,酒精性脂肪肝的发病率及诊断率逐年增加,有上升趋势,并且由于酒精性脂肪肝发生肝纤维化和肝硬化的进程比非酒精性脂肪肝更快,发生率更高,对人体的威胁也更大。因此,更需要该方面药物的开发,本项研究开发出治疗酒精性脂肪肝的药物酒肝清胶囊(已获国家食品药品监督管理局颁发的临床批件),寻找酒肝清胶囊的物质基础及作用机理,并且建立了酒肝清胶囊及原料药的提取方法和质量标准,较好地控制了该药的质量。在工艺研究方面,能在药理研究的基础上,寻找到黄芩、赤芍、甘草等药材的有效成分,并根据有效成分的化学性质,通过正交设计,结合大工业生产的需要及新药申报要求,建立了这三种中药中有效成分的提取模式,采用的提取方法有酸提取法、大孔树脂法、氨渗漉法、有机溶剂精制法等方法。在质量标准研究方面,采用薄层层析法对原料药(黄芩总黄酮、赤芍总苷、甘草总苷)及制剂进行了鉴别,采用分光光度法对原料药中黄芩总黄酮、赤芍总苷及甘草总苷进行了含量测定;采用高效液相法测定了原料药及制剂中黄芩苷、芍药苷及甘草酸的含量,并对制剂中黄芩苷、芍药苷及甘草酸的溶出度进行了测定,较好地控制了该药的质量。对三批原料药及制剂进行了长期稳定性及加速稳定性考察,结果表明,该原料药及制剂在室温及加速条件下,性状、鉴别、装量差异、水份、崩解时限、含量、卫生学指标均无明显变化,符合质量标准草案的各项规定,证明该原料药及制剂稳定性符合新药要求。在药物配伍研究方面,首先根据临床应用情况,建立了能反应临床疗效的药理模型,再结合药学提供的不同组分,筛选出相应中药的有效成分,参考其服用量,设立多个给药剂量,最终筛选出最佳有效量;在此基础上,根据中医理论和药理实验结果,采用正交实验,筛选出最佳配伍比例,最后按新药申报要求,进行药效学和毒理学研究,为原中药二类新药的开发及中药物质基础的寻找建立了完整、有效的研究方法。动物急性毒性实验及动物长期毒性实验表明,该药毒副作用较小;一般药理学实验表明,经十二指肠给药,对猫心率、心电图、呼吸频率和幅度无明显影响。经灌胃给药,对小鼠一般行为活动无显著影响,与戊巴比妥钠无协同作用。药效学实验表明,经预防灌胃给药,可以显著降低酒精性脂肪肝大鼠和小鼠,总胆固醇、甘油三酯、谷丙转氨酶、丙二醛含量,降低酒精性脂肪肝大鼠谷草转氨酶、γ-谷氨酰基转移酶、碱性磷酸酶含量,增加白蛋白和超氧化物歧化酶含量。并且可以明显减轻白酒对小鼠中枢神经抑制作用;经治疗灌胃给药,可以显著降低酒精性脂肪肝大鼠和小鼠,总胆固醇、甘油三酯、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、丙二醛含量,降低酒精性脂肪肝大鼠肿瘤坏死因子含量,增加白蛋白和超氧化物歧化酶含量。黄芩苷灌胃给药后,可降低肝损伤小鼠及大鼠谷丙转氨酶和谷草转氨酶含量,对小鼠及大鼠肝损伤均有明显的保护作用。其作用机理是保护和稳定肝细胞膜,降低肝细胞膜通透性,降低肿瘤坏死因子、丙二醛含量,提高超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性,减少肝内谷胱甘肽消耗,减少自由基的损害。黄芩苷可保护成骨细胞免受高氟水平造成的氧化应激损伤,可以防治高浓度的氟化物诱导的自由基损害。表现在可以降低成骨细胞中丙二醛含量,提高超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性。因此,黄芩苷具有抗体内和体外自由基损伤的作用。总之,本研究的各项结果为原中药二类新药复方的研制及其中物质基础的寻找提供了一种可行的方法,为该药进一步的临床观察提供可靠的理论依据。