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内皮抑素作为已知的肿瘤血管生成抑制剂,可以用于实体肿瘤的治疗。目前临床上内皮抑素浓度的检测主要采用ELISA方法,但该方法耗时久且价格昂贵,我们希望能够找到其它有效的方法能够快速、方便地检测内皮抑素。免疫胶乳比浊法可自动化操作、重复性较好且可以减少非特异性凝集,假阳性率低。因此我们通过用重组人内皮抑素抗体标记合适粒径的胶乳,以合适的吸光度变化范围和较大的线性范围为标准对试剂组分、检测条件等进行调试,通过单因素实验确定了较佳的试剂组分浓度,检测重组人内皮抑素标准品,组成了自制胶乳增强免疫比浊法检测重组人内皮抑素试剂盒。结果表明,大小均一、直径为130 nm的胶乳与碳化二亚胺、N-羟基丁二酰亚胺和内皮抑素抗体共价结合得到致敏胶乳。致敏胶乳的最佳浓度为0.3%,波长为510 nm条件下检测,PEG 6000用量为2.5%,样品加样量为8 μL,防腐剂选择0.05% NaN3,R1试剂与样品反应5 min后加入致敏胶乳后37℃反应10 min进行检测,检测到的吸光度值变化范围大且区分度好。转铁蛋白在抗菌、杀菌以及肿瘤和癌症防治等方面有突出的作用。为了能够更方便地检测转铁蛋白浓度,希望能够研制出胶乳增强免疫比浊法检测转铁蛋白试剂盒。本研究以含转铁蛋白基因的质粒为模板用PCR方法扩增目的基因,用Xho Ⅰ>Nde Ⅰ分别对目的基因及表达载体pET28a进行双酶切获得目的片段和线性质粒。在T4连接酶作用下连接,构建成含转铁蛋白基因的表达载体,为转铁蛋白表达纯化、制备抗体及试剂盒的制备提供了条件。