植物灭螺成分的提取工艺及作用机理研究

来源 :华中师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tapril10
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控制钉螺是防治血吸虫病的关键技术之一。研发高效、持久、安全及价廉(WHO标准)的新型植物灭螺剂是灭螺药物研究的热点。由于缺乏对植物灭螺成分单体水平的构效关系、环境安全及经济性的同步研究,以致尚未研究出一种符合WHO标准的植物灭螺药物。本文研究灭螺植物有效成分的提取分离工艺及对Nic抑螺增效作用、钉螺转氨酶的动力学特征及对钉螺药物的敏感性,为新型灭螺药物研发提供设计依据和物质基础。1.RC灭螺皂甙的提取分离研究RC原粉经MeOH索氏提取和正丁醇萃取、TLC及CCL分离纯化,得到皂甙结晶RCI,其纯度为83.53%。采用WHO试验法测定,5.0 mg·L-1的RCI浸杀钉螺72h,其死亡率为80.0%。结果说明RCI具有较高的灭螺活性。2.SX生物碱的提取工艺研究采用L16(44)正交试验与极、方差分析,以SX果实灭螺生物碱SXⅡ和SXⅢ的质量分数为指标,研究确定其最佳提取条件。SXⅡ的最佳提取条件为:浸提温度40℃、浸提时间15h、水与原料配比10g·mL-1、浸提剂pH3.0;SXⅢ的最佳提取条件为:浸提温度10℃、浸提剂pH3.0、浸提时间15h、水与原料配比10g·mL(-1)。结论为SX生物碱生产应用提供实验基础。3.SX生物碱对Nic抑螺增效研究采用WHO试验法测定,SXⅠ、Ⅱ和Ⅲ浸泡钉螺24h,其死亡率达100%的浓度分别为100、8和200 mg·L-1。用Nic抑螺无效浓度0.25、0.5及1.0 mg·L-1,分别与SXⅠ、Ⅱ及Ⅲ抑螺无效浓度50、2.7及67 mg·L-1联用时,Nic抑螺率分别提高100、60及100%。结果说明SXⅡ具有高效灭螺和增加Nic抑螺效应的作用。4.钉螺GPT和GOT反应动力学特征及对灭螺药物的敏感性研究采用L25(56)正交试验与极、方差分析,以钉螺软体60-90%饱和度盐析蛋白为材料,研究确定了钉螺GPT的反应最适条件为:酶浓度0.1 mg·mL-1、α-酮戊二酸5μmol·L-1、反应体系pH6.5、反应温度30℃、反应时间30min;GOT反应最适条件为酶浓度0.2mg·mL-1、L-天门冬氨酸2.5μmol·L-1、反应体系pH6.0、反应温度40℃、反应时间30min。在4mg·L-1的CuSO4、Nic及SXⅡ药液中,GPT活性抑制率分别为81.2、-32.2及16.2%,GOT活性抑制率分别为89.7、-18.8及-11.4%。结论说明离体钉螺GPT和GOT对CuSO4敏感性较高,对Nic和SXⅡ的敏感性较低。
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