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背景:研究表明,脂氧素A4(LXA4)和LXA4受体(ALX)的激活可以保护多种器官对抗炎症和高氧损伤。在前期的研究中,我们已经证明LXA4诱导血红素加氧酶-1(HO-1)过表达,从而保护氧化应激损伤的心肌细胞和肾小管上皮细胞;LXA4可以抑制大鼠肾小球系膜细胞炎性因子白细胞介素6(IL-6)和IL-1p的表达。因此,我们假设在高氧肺损伤的小鼠肺上皮细胞模型中,LXA4是否通过过表达HO-1和/或下调促炎细胞因子保护肺损伤。目的:探讨LXA4是否诱导HO-1和炎性介质IL-6和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)变化参与小鼠肺上皮细胞高氧损伤的保护及可能涉及的信号机制。方法:小鼠肺上皮MLE-12细胞用0、1、10、50nmol/L浓度的LXA4分别处理0、1、6、12、24 小时。锌原卟啉 IX(ZnPP-IX)、IL-6、抗 IL-6、MCP-1、抗MCP-1、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK),蛋白激酶B(AKT)和细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路抑制剂预处理MLE-12细胞后暴露于空气或高氧(85%02)环境中。RT-PCR验证MLE-12细胞中脂氧素受体(ALX)的表达。台盼蓝染液染色检测细胞存活率,CCK8方法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率。羟胺法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)水平。Real time PCR检测HO-1 mRNA的表达。ELISA法检测细胞培养上清液中IL-6和MCP-1的水平。Western blot检测HO-1、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(P-p38 MAPK)、总P38 MAPK、磷酸化细胞外信号调节的激酶(P-ERK1/2)、总ERK1/2、磷酸化蛋白激酶B(P-Akt)、总Akt的表达。免疫荧光法检测HO-1的表达及其在细胞内的表达。结果:高氧暴露会导致MLE-12细胞活力下降。MLE-12细胞表达ALX。10nmol/LLXA4预处理12h显著改善了高氧暴露损害的细胞存活率、细胞活力、SOD水平和细胞凋亡;LXA4诱导HO-1过表达;HO-1抑制剂ZnPP-IX能够阻断LXA4对细胞高氧损伤的保护作用;外源加入IL-6和MCP-1能显著降低细胞活力,造成细胞损伤;高氧诱导升高的MCP-1和IL-6水平可被LXA4抑制;抗IL-6和抗MCP-1改善高氧暴露导致的细胞活力损伤。抑制p38 MAPK和ERK1/2信号通路阻断了高氧诱导的MCP-1和IL-6的表达。LXA4抑制了高氧诱导的p38 MAPK和ERK1/2的活化,而LXA4诱导上调了被高氧抑制的AKT信号通路。结论:LXA4通过上调HO-1的表达减少高氧诱导的MLE-12细胞损伤。LXA4对高氧诱导的细胞损伤的保护与通过抑制p38MAPK和ERK1/2信号通路下调IL-6和MCP-1水平有关。