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目的原核表达EB病毒（Epstein-Barr virus,EBV）衣壳蛋白p23-p18融合蛋白,研制EBV特异性衣壳抗原（viralcapsid antigen,VCA）抗体ELISA检测试剂。方法①选择p23编码基因BLRF2（氨基酸1～162）和p18编码基因BFRF3的C端（氨基酸105～176）基因序列,设计特异性引物,以EBV标准株B95-8为模板,采用重叠延伸PCR技术,将两段基因通过多肽接头（Gly4Ser）3 DNA序列连接以获得融合基因p23-p18。②融合基因经测序证实序列准确无误后,导入表达载体pThioHis A构建原核表达克隆,转染E.coli BL21后IPTG诱导表达,重组蛋白经镍-敖合物琼脂糖树脂柱亲和层析纯化获得融合抗原,Western blot鉴定其特异性。③用标准阳性血清滴定抗原效价,选择最适浓度包被ELISA反应板,配套商品化的辣根过氧化酶标羊抗人IgM、IgG及其它一系列试剂,反复优化反应条件,组装成EBV特异性VCA IgM和IgG间接ELISA诊断试剂。④选择血清标本进行检测,并与“金”标准即间接免疫荧光（IFA）和NOVATEC公司生产的VCAIgM和IgG ELISA检测试剂盒进行比较,计算该试剂的敏感性、特异性、约登指数、符合率、阳性预测值和阴性预测值等指标,同时检测诊断试剂的重复性和稳定性。结果p23和p18融合基因成功构建并有效表达,Western blot显示融合抗原具有较高的特异性和敏感性。与IFA比较,采用融合衣壳抗原制备的EBVVCAIgG诊断试剂盒的敏感性、特异性、约登指数、符合率、阳性预测值和阴性预测值分别为97.3%、97.4%、0.947、97.3%、99.8%和77.6%;IgM ELISA诊断试剂盒的上述各项指标分别为94.8%、99.5%、0.943、98.7%、97.3%和98.9%。融合抗原ELISA与NOVATEC公司同类产品有较高的符合率（IgG为97.7%,IgM为96.6%）,且具有良好的重复性和稳定性。结论采用p23-p18融合蛋白制备的EBV VCA IgG和IgM ELISA检测试剂敏感特异,简便快速,重复性和稳定性好,进一步完善后可用于临床EBV感染的诊断及流行病学调查。