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目的:本文通过观察低强度超声(low-intensity ultrasound,LIU)联合姜黄素对人脑胶质瘤U87细胞系内EZH2及其下游因子表达情况的影响,探讨低强度超声与姜黄素作用是否协同下调EZH2的表达。方法:U87细胞培养至对数期后进行实验处理。应用姜黄素浓度分别为5、10、15μmol/L处理细胞,同时给予强度分别为83.4、142.0 mW/cm~2的超声辐照处理,作用时间分别为30s、60s、90s,使用CCK-8试剂检测细胞增殖抑制作用,并对所测450nm处OD值进行析因分析。根据CC K-8析因分析结果筛选出来的最适宜姜黄素浓度、超声强度、作用时间设定为后续实验处理条件,即联合组(姜黄素浓度10μmol/L、超声强度为83.4 mW/cm2、辐照时间60s)。将U87细胞分为对照组(Control)、超声组(U83.4)、姜黄素组(C10)、联合组(U83.4CUR10)抑制剂组,低强度超声及姜黄素单独和联合作用后,采用Western bolt检测EZH2及其下游因子H3K27me、H3K27ac的表达情况。结果:1、根据CCK-8所测OD值得出如下结论:(1)低强度超声辐照对胶质瘤U87细胞增殖具有抑制作用,超声强度为83.4 mW/cm2时,其抑制能力与辐照时间及强度正相关(p<0.05)。超声强度为142.0mW/cm2时,其抑制能力与辐照时间及强度无关(p>0.05)。(2)姜黄素抑制肿瘤细胞生长,抑制能力与浓度存在正相关。2、将上述结果纳入多因素方差分析,结果如下:(1)超声辐照强度(UL)、辐照时间(TIME)、姜黄素浓度(CUR)三种作用因素的改变对U87细胞生长抑制的影响均有统计学意义(p<0.05),姜黄素浓度变化对细胞生长抑制影响效果最大(F=14.13),其次为超声辐照时间(F=7.10),超声辐照强度最小。(2)超声强度的变化与辐照时间的变化构成一级交互作用,在α=0.05水准上有统计学意义。(3)超声强度变化与姜黄素浓度变化、姜黄素浓度变化与超声辐照时间变化间无统计学意义。(4)三因素构成的二级交互作用在α=0.05水准上有统计学意义。认为各因素间有交互作用存在,即三者之间对U87的增殖抑制具有协同作用。(5)、依据方差结果,超声强度、辐照时间、姜黄素浓度三者中超声强度83.4 mW/cm2,作用时间60或90秒,姜黄素浓度15μmol/L时对胶质瘤细胞增殖抑制效果最大。超声强度83.4 mW/cm2,作用时间60或90秒,姜黄素浓度10μmol/L时对胶质瘤细胞增殖抑制效果其次,因此选择此条件作为联合组条件。3、经主效应间多重比较和统计量描述可作出以下判断:(1)低强度超声辐照对胶质瘤U87细胞增殖具有抑制作用,辐照时间60s作用强于30s,差异有统计学意义(p<0.05),辐照时间90s与60s差异无统计学意义(P=0.189)。(2)姜黄素抑制肿瘤细胞生长,姜黄素浓度为15μmol/L时的作用明显强于浓度5μmol/L和10μmol/L,差异有统计学意义(p<0.05),浓度5μmol/L与10μmol/L之间差异无统计学意义(P=0.129)。4、低强度超声与姜黄素均能下调EZH2、H3K27me、H3K27ac表达。且联合组下调程度显著高于单独处理组(p<0.05)。5、抑制EZH2后H3K27me下降明显,H3K27ac无显著变化。结论:低强度超声与姜黄素单独或联合作用胶质瘤均可抑制肿瘤细胞增殖、下调EZH2、H3K27me、H3K27ac表达,且联合作用后下调程度更显著高于单独处理组。