基于血清药物化学的蒙药复方森登-4药效物质基础的研究

来源 :内蒙古医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jacob888888
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:本文通过对森登-4有效部位的化学成分进行进一步的系统分离并对本课题组前期分离得到的化合物进行富集,为药效物质基础的研究奠定基础;对于蒙药复方森登-4有效部位针对佐剂型关节炎(Adjuvant Arthritis,AA)模型的治疗效果进行研究;对蒙药复方森登-4进行血清药物化学的研究,建立蒙药复方森登-4化学成分体内外特征图谱,归属并鉴定其体内外化学成分及体内吸收入血的原型化学成分;对蒙药复方森登-4的主要药效成分进行体内含量测定方法的研究,为蒙药复方森登-4有效部位展开药效学研究及阐明其药效物质奠定基础。建立同时对蒙药复方森登-4有效部位及提取液中没食子酸、京尼平-1-β-D-龙胆二糖苷、栀子苷、(2R,3R)-二氢杨梅素、芦丁、杨梅素、槲皮素等指标性成分含量测定方法的研究。  方法:本课题采用硅胶层析柱、Sephadex LH-20、MCI、大孔吸附树脂柱、制备薄层等色谱技术对蒙药森登-4有效部位进行系统分离和纯化,通过理化鉴别并结合现代波谱技术(MS、1H-NMR、13C-NMR)鉴定化合物的结构。  将SD(Sprague Dawley)大鼠随机分成蒙药复方森登-4有效部位组、雷公藤组、塞来昔布组、模型组、正常组。除正常组以外,所有组大鼠被诱导致关节炎。分别给予相对应的药物治疗,用自制足爪容积测量器测定每只大鼠的双足体积,并计算大鼠足爪的肿胀度;用ELISA试剂盒检测血清中TNF-α(Tumor necrosis factor-α)、PGE2(Prostaglandin E2)及IL-6(Interleukin-6)炎性因子的水平。  采用SD(Sprague Dawley)大鼠,通过诱导建立胶原诱导型风湿性关节炎动物模型,灌胃给予蒙药复方森登-4有效部位及其各单味药,分离并制备含药血清,HPLC法检测,分析蒙药复方森登-4体外及含药血清HPLC特征图谱。  采用高效液相色谱串联质谱法(HP LC-MS/MS)测定蒙药复方森登-4体内药效活性成分的含量。  采用HPLC法同时测定蒙药复方森登-4有效部位及提取液中多指标性成分的含量。  结果:从森登-4有效部位中共得到9个单体化合物,分别为杨梅素、(2R,3R)-二氢杨梅素、没食子酸、栀子苷、京尼平-1-β-D-龙胆二糖苷、槲皮素、芦丁、儿茶素、没食子儿茶素。其中儿茶素、没食子儿茶素为首次从森登-4有效部位中分离得到的化合物。  通过分析,蒙药复方森登-4有效部位给药组、塞来昔布给药组大鼠足肿胀度与模型组相比差异显著(P<0.01),而雷公藤给药组大鼠的足肿胀度与模型组相比也存在差异(P<0.05),而与正常组相比,足肿胀度没有明显差异。在检测炎症因子TNF-α、PGE2、IL-6水平时,蒙药复方森登-4组、雷公藤组、塞来昔布组与模型组存在差异(P<0.05),而蒙药复方森登-4与模型组存在显著差异(P<0.01),与正常组相比无显著差异(P>0.05)。  通过对蒙药复方森登-4体外HP LC特征图谱分析发现共有47个峰,鉴定出其中15个峰为蒙药复方森登-4成分,而其中14个入血成分即为SD大鼠在灌胃给予蒙药复方森登-4有效部位后出现的,9个为体外直接入血成分,另外5个入血成分推测为新生代谢产物,通过与标准品比对,鉴定出7个已知的蒙药复方森登-4成分。  建立了高效液相色谱串联质谱法对蒙药复方森登-4体内药效活性成分的含量测定方法。  建立了对蒙药复方森登-4有效部位和提取液中没食子酸、京尼平-1-β-D-龙胆二糖苷、栀子苷、(2 R,3R)-二氢杨梅素、芦丁、杨梅素、槲皮素等指标性成分含量的测定方法。  结论:入血成分及代谢产物为蒙药复方森登-4体内直接作用的活性成分。蒙药复方森登-4能够调节风湿性关节炎不同的炎症因子,而风湿性关节炎的炎症因子降低与风湿性关节炎的有效治疗呈正相关,并通过血清药物化学的研究进行了佐证,为蒙药复方森登-4治疗风湿性关节炎的药效物质基础研究奠定基础。
其他文献
期刊
菊科兔儿风属植物全世界约有70种,分布于亚洲东南部,我国有44种,主要分布于长江流域及其以南各省区如四川、贵州、云南等地。该属植物在民间广泛用于治疗胃痛、跌打损伤、水肿、风湿性关节炎等。到目前为止,从本属植物中分离到的化合物主要有倍半萜、三萜和黄酮等。大头兔儿风Ainsliaea macrocephala (Mattf.) Y.C. Tseng是中国特有植物,产于云南西北部(中甸、丽江)和四川西南