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目的:探讨长链非编码RNA胃癌高表达的转录本1(Long non-coding RNA gastric carcinoma high expressed transcript 1,LncRNA GHET1)对人胃癌细胞株增殖、侵袭的作用及调控机制,为胃癌的靶向治疗提供参考依据。方法:(1)以人永生化的胃黏膜细胞株GES-1为对照,采用qRT-PCR检测GHET1在各胃癌细胞株BGC-823,AGS,SGC-7901,HGC-27中的表达情况,筛选出适合体外沉默GHET1的胃癌细胞株;(2)利用si-RNA技术构建细胞干扰模型,si-FAM检测转染效率,qRT-PCR检测干扰效率;(3)采用CCK-8实验检测敲低GHET1后AGS活细胞数的改变,Hoechst 33342染色实验观察AGS细胞凋亡的形态改变;流式细胞术检测转染si-GHET1后AGS细胞周期与凋亡的变化;Western blot检测敲低GHET1后,AGS细胞周期相关蛋白P21、cyclinE、cyclinD、CDK2、CDK4、CDK6表达水平的改变,最后利用划痕实验和Transwell实验检测AGS细胞侵袭能力和细胞迁移能力的改变。结果:(1)与人永生化胃黏膜上皮细胞GES-1相比,GHET1的表达量在四株不同分化程度的人胃癌细胞株中均升高,其中以AGS表达上调(3.20±0.31)最为显著(P<0.001);(2)利用si-RNA技术构建干扰细胞株模型,荧光显微镜检测si-FAM转染效率约为85%,qRT-PCR检测si-GHET1干扰效率达(58.02±6.33)%,(P<0.01),实验分三组:空白control组、阴性对照si-NC组和干扰si-GHET1组;(3)CCK-8实验结果显示,敲低GHET1后,AGS在48h和72h时活细胞数相对减少(P<0.001),PCNA蛋白在48h表达水平降低(P<0.01),流式细胞术结果进一步提示AGS细胞周期阻滞在G0/G1期(P<0.01),Western blot实验检测转染48h后AGS各组细胞周期相关蛋白的表达情况,相对于control组和si-NC组,si-GHET1组P21表达水平升高(P<0.001),cyclinE、cyclinD、CDK2、CDK4、CDK6表达水平均有不同程度下降(P<0.05);(4)Hoechst 33342染色实验结果和流式细胞术凋亡结果显示,沉默GHET1对AGS细胞凋亡改变无显著影响(P>0.05);(5)划痕实验结果和不铺Matrigel胶的Transwell迁移实验结果提示,沉默GHET1后胃癌细胞AGS迁移能力受到抑制(P<0.01);铺Matrigel胶的Transwell侵袭实验结果提示,沉默GHET1后胃癌细胞侵袭能力受到抑制(P<0.01)。结论:(1)沉默GHET1后人胃癌细胞AGS增殖能力受到抑制、细胞周期出现G0/G1期阻滞。(2)沉默GHET1后,胃癌细胞的迁移、侵袭能力受到抑制,提示GHET1的高表达可能与胃癌细胞侵袭调控有关。(3)沉默GHET1后,胃癌细胞增殖受到抑制,其机制可能是细胞周期相关蛋白P21表达水平升高,cyclinD、CDK4、CDK6、cyclinE、CDK2表达水平降低导致。提示GHET1作为胃癌细胞增殖调控的重要影响因素,可能通过改变细胞周期相关蛋白的表达来促进胃癌细胞增殖,进而加速胃癌的发生和发展。