离子液体介导免疫传感器的研制

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离子液体作为一种新型绿色溶剂,具有独特的理化性质。近年来,离子液体作为介质或催化剂被广泛应用于液/液萃取、有机合成、非水生物催化等领域。然而,离子液体在构建免疫传感器中的应用报道很少,开展离子液体介导免疫传感器研制具有十分重要的现实意义。采用“无溶剂”和“逐步升温”等技术改进的方法合成1-丁基-2,3-二甲基咪唑六氟磷酸盐、1-戊基-2,3-二甲基咪唑六氟磷酸盐、1-异辛基-2,3-二甲基咪唑六氟磷酸盐三种新的离子液体,反应总转化率在88%和93%之间。离子液体粗品用丙酮稀释后,经活性炭脱色制得无色离子液体,样品在400800nm范围内未见吸收。离子液体的结构被红外、核磁分析所证实。考察离子液体的密度、电导率、粘度和在水中的溶解度等理化性质,发现密度和电导率随离子液体中阳离子侧链烷基碳原子数的增加而降低,而粘度正好相反。我们基于咪唑阳离子在211nm处的吸光度与其浓度呈线性关系,建立了测定二甲基咪唑类离子液体溶解度的分光光度法。该方法简单、灵敏和准确,它已用于1-戊基-2,3-二甲基咪唑六氟磷酸盐水溶性的测定,结果为2.813mg/mL。将四乙氧基硅在盐酸催化下水解形成的硅溶胶、离子液体和黄曲霉毒素B1(AFB1)抗体混合后涂于玻碳电极表面制得非标记型AFB1抗体免疫传感器。以Fe(CN)63-/4-磷酸缓冲溶液(pH7.4)为测试底液,采用交流阻抗和循环伏安法研究电极的电化学性能。结果显示免疫反应后循环伏安图上的氧化还原峰电流减小,而交流阻抗值增大,这些表明电极表面发生的免疫反应阻碍了Fe(CN)63-/4-在电极表面的扩散。当采用交流阻抗监测电极表面,发现传感器的电子转移阻抗随AFB1浓度的增加而增大。对交流阻抗图进行分析,结果表明电极表面的反应是一个受电子转移控制的过程。在新合成的离子液体中,1-戊基-2,3-二甲基咪唑六氟磷酸盐作为介质免疫传感器对AFB1响应灵敏,且绝对阻抗值最小而被选用。在最佳条件下,方法检出限为0.1ng/mL(S/N=3),线性范围为110ng/mL。此免疫传感器具有良好的稳定性,4℃下保存25天与新制备电极响应基本一致,方法已成功应用于样品中痕量AFB1的测定。按黄曲霉毒素传感器相似的方法制得离子液体介导的虾抗体免疫传感器。采用交流阻抗法研究了传感器在不同浓度的虾过敏原溶液中的电子转移阻抗的变化,结果显示电子转移阻抗值随溶液中虾过敏原浓度的增加而增大,在虾过敏原浓度为112ng/mL时呈线性,检出限为0.1ng/mL。此虾抗体离子液体免疫传感器的稳定性在3周以上,方法已用于虾制品中过敏原的测定,结果令人满意。
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