家蚕是一种重要经济吐丝昆虫,也是研究昆虫分子生物学以及免疫学的模式生物,在蚕丝产业和昆虫科研领域都有极其重要的作用。家蚕核型多角体病毒（Bm NPV）是家蚕饲养的过程中主要病原微生物之一,由其引起的家蚕核型多角体病毒病对蚕丝产业的危害极大,传染性极强,难以控制,每年都会给养蚕业带来严重损失,严重阻碍了蚕丝产业的发展。本研究把亚细胞蛋白质组学的研究作为切入点,以家蚕中肠亚细胞蛋白组分分离技术为基础,结合SDS-PAGE、2-DE、Far-western blot技术,在体外鉴定与Bm NPV相互作用的中肠亚细胞组分蛋白,期望对Bm NPV的侵染机制作出一定程度上的补充。研究结果如下:1.本研究成功分离家蚕中肠亚细胞组分,提高了蛋白鉴定的分辨率。2.本研究以Far-western blot的方法在家蚕中肠线粒体、微粒体亚细胞组分中一共鉴定了24个能在体外与Bm NPV结合的蛋白。3.对筛选的候选蛋白在不同家蚕品系中进行RT-q PCR验证,结果表明:除了trypsin之外,其余23个基因在抗性品系A35添毒24 h后,表达水平均下调;感性品系P50添毒24 h后,H+-ATPaseβ1、H+-ATPase d、AK2、ECH1、ECH2、ETFalpha、SSR-beta、Acads、RACK-1等基因呈现出上调趋势,HIBADH、H+-ATPaseβ2、SDRs、YWHA等基因变化趋势不明显,V-ATPase A、V-ATPase B、actin-4、ATP synthase、e EF1 gamma、AST、SP、LIPH、VDAC2、β-tubulin等呈现出下调趋势。其中H+-ATPaseβ1、H+-ATPase d、AK2、ECH1、ECH2等能量相关基因在两个品系中呈现出相反的趋势,推测这几个基因可能与品系之间抗性差异有关。4.根据对候选互作蛋白的功能分析结果,从候选互作蛋白中选择膜融合相关蛋白进行验证,相关蛋白分别是V-ATPase-A,V-ATPase-B和actin-4。原核表达出以上三个蛋白,然后利用原核表达的蛋白进行Far-western blot病毒孵育实验验证,结果证实这三个蛋白确实能在体外与Bm NPV互作。综合以上研究结果,从全新的角度对家蚕的病毒入侵的机制做了一定程度的补充,为后续进一步研究病毒与宿主互作以及Bm NPV致病机理研究提供有价值的信息。