对虾养殖是我国养殖范围最广，面积最大的海水养殖业，养殖面积达到200万亩以上。目前国内外已发现对虾杆状病毒十余种，严重影响了这一产业的发展，其中对虾白斑杆状病毒（White spot bacilliform virus，WSBV）是近几年来引起虾病的主要病原，在我国和亚洲养殖对虾中高度感染，引起很大经济损失。因为病毒病现在尚无特效药予以治疗，并且对虾没有脊椎动物那样完善的免疫系统，因此也无法用常规疫苗的方法来达到抗病毒的目的。反义RNA技术是近年来发展起来的一种新的抗病毒技术，通过与转基因技术结合来培育新的抗病毒对虾品系，为对虾的病毒防治开辟了一条新的途径，如果转基因对虾体内能大量转录病毒某个关键基因的反义RNA链的话，便能在RNA水平上阻断该病毒基因的翻译表达，使病毒无法在对虾体内进行正常的感染增殖，从而达到抗病毒的效果。 进行日本对虾反义RNA转基因抗病毒研究，构建合适的转基因载体是很关键的，构建反义RNA转录载体首要的问题便是载体选用的启动子。对虾转基因载体的启动子首选对虾肌动蛋白基因的启动子，肌动蛋白基因的启动子在很多生物中都被证实是强启动子，鲤鱼肌动蛋白基因的启动子现在已经广泛地应用于鱼类转基因育种领域。但是对虾肌动蛋白基因包括其启动子在国内外尚无文献报道，属于未知基因。首先，从日本对虾（Penacus japonicus）的总mRNA中利用RT-PCR的方法克隆到肌动蛋白基因的部分cDNA片段（805bp），并提取日本对虾的染色体DNA，利用接头介导的PCR方法直接从日本对虾的染色体DNA中克隆到了四种肌动蛋白基因的启动子，同时也克隆到了三种肌动蛋白基因的 反义MA转录载体构建和对虾转基因技术研究 终止子，这些元件都可用于对虾转基因载体的构建。 构建反义RNA转录载体的另一个关键问题便是反义载体选用的靶基因。 WSBV是一个环状的双链DNA病毒，全长305，107碱基，是目前发现的最大 的海洋动物病毒，通过生物软件（DNAMAN 5刀）对其基因组序列进行分析，找到 了一个构建反义RNA载体的一个极好的靶基因一病毒的DNA聚合酶基因， DNA聚合酶基因无疑是病毒基因组复制传代的关键基因，如果转基因对虾体内 能大量表达该基因的反义链的话，就有可能在RNA水平上阻断该基因的翻译表 达，从而阻断病毒复制增殖面达到抗病毒效果。 在这些工作基础上，成功地构建了带有绿色荧光蛋白（GFP）基因的反义RNA 转录载体。利用该载体，还进行了日本对虾电转化转基因的初步研究，基本上 确定了转基因介质和电转化的各项物理参数。这些都为今后进一步开展日本对 虾转基因抗病毒基因工程育种研究打下良好的基础。