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为探讨生长激素在转基因猪后代体内的表达量及其与生长性能的相关性,同时为节粮型高瘦肉率转基因猪品种的培育奠定科学基础,本研究针对用精子介导纳米基因裁体法制备的F0代母猪与非转基因公猪配种所产的16头F1代仔猪,经PCR扩增、克隆测序后确定转基因阳性率。分别提取耳组织和血液中总RNA,RT-PCR,进行实时荧光定量PCR。根据RT-PCR中确定的试验所需内参基因,结合30日龄、90日龄、150日龄样品和内参样品所得的扩增曲线和熔解曲线图谱,分析16个样品不同生长阶段的总荧光强度,峰值特异性及组织差异性,确定猪生长激素基因在转基因猪和非转基因猪体内的表达量差异。测量统计16头后代猪的30日龄、90日龄、150日龄体重,通过独立样本T检验和个体日增重的分析,经校正后与第一阶段所得pGH基因在猪体内的不同表达水平进行关联。结论如下:
1.F1代仔猪中有7头为转基因猪,9头为非转基因猪。
2.同期耳组织中的pGH表达量低于血液中pGH表达量.
3.F1代猪的pGH基因平均表达量在两组待测猪群中呈现明显不同。30日龄时转基因组pGH表达量低于非转基因组;90日龄时,虽然转基因组高于非转基因组pGH表达量,但差异不明显;150日龄时,转基因组pGH表达量明显高于非转基因组。
4.F1代转基因猪的平均日增重在30日龄之内低于非转基因猪17.8372g,90日龄时,已超过非转基因猪,90日龄到150日龄之间,持续优势生长速度.
5.荧光定量PCR所得倍比关系F值与体重均值、体重均差值趋势相同,pGH基因表达量对动物体的生长发育速度有显著作用。