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背景与目的：肺癌是严重威胁人类健康的主要恶性肿瘤之一。尽管每年国家针对肺癌的治疗投入了大量的人力、物力和财力,但由于肺癌潜伏性较强,恶性程度较高,经发现往往处于疾病的晚期阶段,从而错过了最佳的治疗时机。因此提高肺癌患者的临床诊断和风险评估成为目前国内外关注的一个热点问题。microRNA (miRNA)是一类长约18nt-25nt的单链非编码RNA,其可以直接与靶基因mRNA互补结合,导致靶mRNA分子降解或翻译受阻以降低靶基因的表达,从而参与细胞的增殖、分化等过程。如果其中某一个或者某几个miRNA出现明显地异常表达,则会导致肿瘤等多种疾病的发生。尽管目前已有大量文献报道miRNAs在肺癌致病机理中的作用,但全血中的miRNAs是否可以作为肺癌临床诊断的生物标志物仍存在较大争论。鉴于此,本课题采用Illumina公司的Solexa高通量测序技术比较非小细胞肺癌患者与对照全血细胞中的差异表达miRNAs,并与目前文献报道的肺癌组织中差异表达的miRNAs进行比较,从而筛选出与非小细胞肺癌相关的,miRNAs,为今后肺癌的临床诊断奠定基础。方法：本研究我们收集7例非小细胞肺癌患者和7例年龄性别相匹配的非癌症病人作为对照。抽取静脉血5ml,提取全血细胞的small RNA,并分别构建两组混合样本的small RNA文库。利用Solexa(Illumina)高通量测序技术对两组small RNA组成成分进行检测,比较两组样本rmiRNA的表达差异,找出明显上调或下调的已知miRNA,最终建立非小细胞肺癌特有的rmiRNA表达谱特征。同时与已知文献报道的肺癌组织中差异表达的miRNAs进行比较,找出两者间的联系。结果：建立了非小细胞肺癌全血细胞miRNA的表达谱,在肺癌患者全血细胞中共检测到miRNAs 5,780,071条,代表409种miRNAs;通过对病例与对照样本的miRNA含量进行比较,以P<I.00E-6和倍比差异1.5倍作为标准,共发现差异表达miRNAs142种,其中表达上调105种,表达下调37种；并与已知文献报道的肺癌组织中差异表达的miRNAs进行比较,发现肺癌患者全血细胞中共有24个差异表达的miRNA与已发表的组织结果相一致。结论：1、本研究成功建立了以第二代高通量测序为基础的small RNA的测序方法,并在病例与对照样本中分别建立small RNA文库；2、成功建立了非小细胞肺癌全血细胞rmiRNA的表达谱,共检测出409种miRNAs,无论从通量还是miRNAs检测数目来说都高于其他同类型研究,为今后肺癌全血细胞的其他miRNAs研究奠定基础。3、本研究结果提示非小细胞肺癌患者全血细胞ImiRNAs与对照相比具有很明显的差异,且肺癌患者全血细胞与组织miRNAs的表达存在一定相似性,因此对这些具有相似表达模式的全血细胞miRNAs进行检测,或许可以为肺癌的临床诊断和临床用药提供一定参考。