牛流行热是由牛流行热病毒(bovine ephemeral fever virus,BEFV)引起的一种牛的传染病,在世界范围内造成很大的危害和经济损失。目前,对于BEFV的感染和致病等方面的研究较少,尤其是其致病机制的研究尚不清楚。许多动物病毒在感染宿主细胞的过程中可诱导细胞发生凋亡,并与动物疫病的发生存在一定的相关性。本论文对BEFV感染诱导牛肾上皮细胞MDBK(Madin-Darby bovine kidney)细胞系和小鼠胚胎成纤维细胞L929(NCTC clone 929)细胞系凋亡的能力进行了研究。首先采用四甲基偶氮唑蓝(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT)法检测了BEFV感染对MDBK细胞和L929细胞生长的影响。进而探讨了这种抑制作用与细胞凋亡的相关性,为此,用倒置显微镜对BEFV感染的MDBK细胞和L929细胞的形态学进行了观察;用AO/EB凋亡染色试剂染色,荧光显微镜下观察细胞凋亡情况;并采用透射电镜进一步观察凋亡细胞的超微结构,流式细胞术计数细胞凋亡率。结果显示,BEFV感染可以以时间和剂量依赖性的方式抑制MDBK细胞和L929细胞的生长。在光学显微镜可见BEFV感染后,这两种细胞的体积均变小,有相当数量的细胞变圆,甚至开始从底壁上脱落,在细胞死亡时,死亡的细胞也呈现细胞变小、变圆、形成由膜包裹着的凋亡小体等比较典型的凋亡形态学特征。AO/EB染色可见BEFV感染的MDBK细胞和L929细胞均发生凋亡,凋亡的细胞其核内物质着色较深,在核膜周围的分布较多,呈不均匀的亮绿色荧光,随着时间的推移,这种形态的细胞增多,晚期凋亡细胞被AO和EB共同染成橘红色。在电镜下观察可见细胞核固缩,染色质向核膜周围聚集等。流式细胞术检测结果显示,BEFV感染诱导MDBK细胞和L929细胞的凋亡同样呈现时间和剂量依赖性。