论文部分内容阅读
目的以兔VX2移植瘤为实验对象,采用两种不同浓度的医用臭氧在B超实时监测下行经皮穿刺瘤内注射,并采用与假手术治疗作为对照方法,观察臭氧局部注射治疗实体肿瘤的安全性,不同浓度臭氧的治疗疗效及对肝肾功能的影响及其病理学改变。材料与方法一、移植瘤模型制作:新西兰大白兔24只(2.2~2.5Kg),雄性。采用瘤细胞混悬液局部注射接种于两侧臀部近大腿根部皮下穿刺接种VX2瘤株。14d后肿瘤直径达1.6~3.4cm(2.3±0.85cm)作为实验瘤兔模型。二、实验分组及治疗处理1.分组及治疗:满足治疗条件的VX2移植瘤模型兔共计24只,随机分为3组:A组注射臭氧浓度40μg/ml,9只瘤兔;B组注射臭氧浓度70μg/ml,9只瘤兔; C组假手术组6只瘤兔。A、B组为治疗组,瘤兔用兔台固定后,在B超实时监测下定位,注射气体行消融治疗,一次性注射完成,治疗剂量相同:2ml。C组假手术组以同样方法穿刺到位后,不注入任何气体或液体。2.治疗前后处理:①所有瘤兔术前一天、术后一天及三天抽去静脉血1ml,检测肝肾功能;②观察术后瘤兔的反应及并发症情况;③术后三天采血后处死瘤兔,观察大体标本、坏死情况,取病理标本,行HE染色观察肿瘤局部干预后组织变化情况。统计学分析应用SPSS13.0统计软件,计量资料以均数±标准差(x±S)表示,统计前经方差齐性检验,各组间比较采用方差分析,两两比较采用Bonferroni检验方法,组内比较采用t检验,计数资料采用卡方检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果1.实验动物术后一般情况三组动物术后24h内均出现活动减少、纳差,对刺激反应差,精神萎靡,术后24h基本恢复正常。以A、B组实验动物表现明显。A、B组各有一只瘤兔于术中及术后1h内死亡,两兔均为术中注射臭氧后出现呼吸急促、抽泣样呼吸、躁动,唇绀,于胸外按压胸廓行心肺复苏后抢救无效死亡,考虑为实验早期操作失范,臭氧进入血管,空气栓塞所致,死亡兔均及时补充。经卡方分析各组死亡率无差异(P>0.05)。B组一只瘤兔术后出现短暂性跛行后自愈。余瘤兔均未出现严重并发症。2.肝肾功能1) ALT:干预前1天各组血清ALT水平,分别为A组=52.89±22μ/L,B组=56.67±31μ/L,C组=59.17±24μ/L,各组间差异无统计学意义(P>0.05)。术后1天各组血清ALT水平达到峰值,分别为A组=72.78±24μ/L,B组=69.56±28μ/L,C组=67.00±29μ/L,术后1天各组与术前血清ALT水平均无显著差异(P>0.05);术后3天血清ALT水平开始下降并趋于术前水平,分别为A组=54.78±20μ/L,B组=57.22±29μ/L,C组=62.67±21μ/L,各组间行两两比较各组亦无显著差异(P>0.05)。2)干预前1天各组血清AST水平,分别为A组=58.33±19μ/L,B组=47.44±14μ/L,C组=50.83±20μ/L,各组间差异无统计学意义(P>0.05)。术后1天各组血清AST水平达到峰值,分别为A组=68.33±16μ/L,B组=88.77±39μ/L,C组=62.83±32μ/L,术后1天各组与术前血清AST水平均无显著差异(P>0.05);术后3天血清AST水平开始下降并趋于术前水平,分别为A组=43.33±22μ/L,B组=40.22±17μ/L,C组=47.67±14μ/L,各组间行两两比较各组亦无显著差异(P>0.05)。3)干预前1天各组血清Cr水平,分别为A组=52.60±29μmol/L, B组=50.22±10μmol/L,C组=50.00±10μmol/L,各组差异无统计学意义(P>0.05)。术后1天A, B两组血清Cr水平达到峰值,C组干预前后无变化,分别为A组=78.56±32μmol/L,B组=78.22±37μmol/L,C组=51.33±14μmol/L,术后1天各组与术前血清Cr水平均无显著差异(P>0.05),术后3天血清Cr水平开始下降并趋于术前水平,分别为A组=56.22±26μmol/L,B组=57.89±18μmol/L,C组=50.00±13μmol/L,各组间行两两比较各组亦无显著差异(P>0.05)。3.大体标本及病理学观察肉眼下A、B两组均可见局灶坏死肿瘤组织,局部充血肿胀,肿瘤内消融区周边为乳白色乳糜样坏死组织,中间为液化坏死组织,A、B组间坏死区大体标本无明显差异。C组接种肿瘤处可见肿瘤呈近似圆柱形,灰白色鱼肉样实性肿瘤组织。光镜下观察A、B组,见肿瘤细胞大片凝固坏死,表现为组织、细胞结构破坏,部分形态尚存,见细胞破裂、溶解、坏死细胞碎片。C组镜下相似,肿瘤与附近组织界限欠清晰,部分肿瘤细胞突破肌层向深处生长,肿瘤细胞排列紊乱,呈巣状或弥漫性分布,可见大量癌巢形成,细胞核大深染,可见核分裂,异性核。结论1.浓度40μg/ml和70μg/ml的医用臭氧经皮注入实体肿瘤后对肝肾功能无显著影响,不同浓度间无显著性差异。2.浓度40μg/ml和70μg/ml的医用臭氧不同两组间消融区域其大体标本及病理学改变无显著差异3.按严格的操作步骤及实时监测下,经皮注射医用臭氧治疗实体肿瘤VX2是安全、有效的实体肿瘤局部治疗方法。