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目的:本实验旨在观察FK506能否使新生SD大鼠背根神经节内雪旺细胞合成并分泌神经突起生长导向因子Slit2,进而促进神经元突起的分枝形成以及神经突起之间建立有效的联系。为研究FK506的神经再生机制提供实验基础。方法:本实验首先建立背根神经节内神经元与雪旺细胞混合培养体系,鉴定神经元与雪旺细胞。然后将不同浓度的FK506加入细胞培养液中,利用RT-PCR技术测定雪旺细胞表达Slit2mRNA的量以及神经元突起中表达GAP-43mRNA的量。应用细胞免疫荧光技术观察神经元突起分枝以及突起间建立联系的情况。利用MTT法测定细胞培养体系中雪旺细胞和神经元的生长活力。利用流式细胞仪测定细胞培养体系中存活的神经元数量。结果:细胞在加入不同浓度的FK506继续培养48小时后,RT-PCR结果为FK506 1nM,10nM,100nM组雪旺细胞表达Slit2 mRNA量以及神经元表达GAP-43 mRNA量均明显高于未加FK506的空白对照组(P<0.05),并且FK506浓度为10nM时雪旺细胞表达Slit2mRNA量以及神经元表达GAP-43 mRNA量最高(P<0.05)。细胞免疫荧光的结果为FK506 1nM,10nM,100nM组神经元的突起生长长度、分枝以及神经突起间形成的网络均优于未加FK506的空白对照组,同样FK506浓度为10nM时神经元突起长度、分枝数和神经突起间形成的网络均明显好于其他组。MTT测定细胞活力的结果为FK506浓度为10nM时神经元与雪旺细胞生长活力最佳(P<0.05),FK506 1nM组次之,空白对照组与FK506100nM组神经元与雪旺细胞生长活力最低,并且两组差异没有统计学意义。流式细胞仪测定FK506 10nM组存活神经元占细胞培养体系比例最高(P<0.05),FK506 1nM组神经元数低于FK506 10nM组,但是差异没用统计学意义(P>0.05),空白对照组与FK506 100nM组神经元所占比例最低,并且差异没有统计学意义(P>0.05)。结论:1、FK506能够促进雪旺细胞分泌神经元突起生长导向因子Slit2,而且FK506发挥作用时存在“剂量-效应”依赖趋势,过高或过低浓度均不利于雪旺细胞的生长和神经再生因子的分泌。2、FK506通过Slit2能够促进背根神经节内神经元突起的延伸、分枝的形成和神经突起间联系的建立。3、FK506促进神经再生作用的发挥有赖于神经胶质细胞所形成的再生微环境。