3D打印马鹿角粉组织工程骨支架的体外及体内实验研究

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目的:构建一种新型支架材料(马鹿角粉/PVA支架),通过检测其理化、生物性能、体内急性毒性实验及构建异位成骨模型,评价并探讨其作为骨组织工程支架的可行性。方法:利用3D打印技术,制备出马鹿角粉/PVA支架,进行孔隙率、孔径、吸水率、压缩力学性能、细胞毒性的检测、体内急性毒性检测及回植大鼠肾被膜后大体观察、HE染色、RT-PCR。结果:(1)孔隙率及孔径:马鹿角粉/PVA支架与纳米级羟基磷灰石/聚乙烯醇(n-HA/PVA)支架作对比,两组支架孔隙率比较无差别,马鹿角粉/PVA支架孔径大于n-HA/PVA支架(P=0.004);(2)吸水率:在不同时间点上,n-HA/PVA支架的吸水率大于马鹿角粉/PVA支架,但马鹿角粉/PVA支架持续吸水的时间较长;(3)压缩力学性能:两组支架的抗压缩性能无差别(P=0.243),马鹿角粉/PVA支架韧性较n-HA/PVA支架好;(4)细胞毒性检测:马鹿角粉/PVA支架细胞相容性比n-HA/PVA支架好;(5)急性全身毒性检测:材料浸提液腹腔注射后,72h观察期间内各组大鼠均存活良好,各组大鼠体质量变化无差别(P>0.05);(6)回植后相关检测:回植动物时材料分为3组:实验组1-BMSCs细胞膜复合马鹿角粉/PVA支架组;实验组2-单纯马鹿角粉/PVA支架组。对照组-空支架组。HE染色可见,1月末,细胞膜-支架组及单纯支架组支架周围及孔隙内充满结缔组织和血管,有较多的炎症细胞分布,两组间无明显区别,2月末两实验组炎症细胞减少,细胞膜-支架组中结缔组织周围出现淡蓝色类软骨样物质,对照组两时间段均为大量脂肪组织和少量结缔组织及血管;RT-PCR结果分析得,随着时间的延长RUNX2的表达呈上升趋势,而COL-1,IL-1,RANKL的表达则呈下降趋势,各组基因表达与对照组均存在差别(P<0.01)。结论:马鹿角粉/PVA支架具有良好的机械力学性能、细胞及体内实验均显示具有良好的生物相容性,在体内模拟环境下BMSCs细胞膜复合马鹿角粉/PVA支架组在成骨方面显示较好的优势,可作为异种骨支架材料研究的新方向。
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