胆总管梗阻致急性胆囊炎及梗阻解除后血清IL-6、胆囊组织中IL-6、MPO和胆囊病理的研究

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目的:胆总管梗阻所致胆囊炎为临床常见疾病,但各种原因导致胆道梗阻继发的胆囊炎报道甚少,国内亦未见胆总管梗阻致急性胆囊炎及梗阻解除后胆囊组织中白细胞介素-6与中性粒细胞(PMN)浸润情况的动物实验研究。本研究对家兔采取不同手术方式,来观察胆总管梗阻及胆总管梗阻解除后不同时段的血清当中白细胞介素-6(Interleukin-6 , IL-6),胆囊组织中IL-6、髓过氧化物酶(Myeloperoxidase , MPO)含量及胆囊病理学改变,为临床上治疗胆总管梗阻引起的急性胆囊炎提供理论和实验依据。方法:选用健康家兔54只,雌雄各半,体重2.2-2.5kg/只。随机分为9组,分别为正常对照组(N组),胆总管梗阻1天组(L1组)、3天组(L3组)、5天组(L5组)、7天组(L7组),胆总管梗阻1天后解除组(R1组)、3天组(R3组)、5天组(R5组)、7天组(R7组),每组6只。所有家兔手术前禁食过夜,自由饮水。用3%的戊巴比妥钠(30-40mg/kg)腹腔注射麻醉,在无菌操作下行上腹正中切口(长3cm),仔细游离胆总管下段,经其后壁置一外径为2mm的细硅胶管,将硅胶管两端经皮下隧道由腹壁戳孔引出,腹壁引出处距正中切口2cm,提起并结扎导管,直视下观察以能阻止胆流为度,关腹并固定导管。分别按分组L组于梗阻后1天、3天、5天、7天处死动物,R组于胆总管梗阻解除3天后处死动物。无菌心脏采血5ml,用放射免疫法测定白细胞介素-6 (IL-6),各组采血后摘取胆囊,将胆囊纵行切开为两半,将其中一半研磨成匀浆,用放射免疫法测定胆囊组织中的IL-6、比色法测定髓过氧化物酶(MPO)。其余胆囊组织于10%中性甲醛中固定,制作石蜡切片,常规HE染色后光镜下观察胆囊组织的炎症变化,尤其是中性粒细胞浸润情况。所得结果均以均数±标准差(X±S)表示。各组间均数采用单因素方差分析及SNK(Student-Newman-Keuls)方法进行统计学检验,P<0.05认为有统计学意义。结果:病理:L1、L3组胆囊肿大,壁水肿增厚,粘膜皱壁完好,光镜下粘膜上皮完好,固有膜、肌层、浆膜都有水肿,并有血管扩张充血及少量炎症细胞(中性粒细胞)浸润。随着梗阻时间的延长,胆囊的炎症加重,胆囊肿大更明显,有絮状渗出物,囊壁增厚,胆汁混浊,粘膜可见灰黄色渗出物附着或形成假膜。部分粘膜坏死脱落,有小溃疡,同时往往伴有胆结石。光镜下粘膜上皮脱落,血管扩张充血,粘膜、固有膜、肌层、浆膜均可见大量中性粒细胞弥漫性浸润。L7组整个胆囊呈深暗红而发黑壁薄而脆,粘膜皱壁消失,呈坏死状。光镜下粘膜上皮消失,见大量白细胞碎屑及出血,肌层模糊不清,常伴有胆囊周围炎,甚至出现坏疽。胆总管梗阻解除后,胆囊炎症较胆总管梗阻同时段明显减轻。胆囊组织中IL-6、MPO:胆囊组织中IL-6、MPO随着胆总管梗阻时间延长逐渐升高,L7组最为明显,胆总管梗阻各组之间比较均有显著性差异(P<0.05)。胆总管梗阻解除组与同时段梗阻组比较,胆囊组织中IL-6、MPO均降低,且有显著性差异(P<0.05)。血清中IL-6:血清中IL-6随着胆总管梗阻时间延长逐渐升高,L7组最为明显,自胆总管梗阻后5天组开始显著升高(与正常对照组比较,P<0.05)。胆总管梗阻解除后,血清中IL-6显著降低(P<0.05)。结论:1 IL-6在胆总管梗阻所致胆囊炎症发生发展过程中起重要作用。2随胆总管梗阻时间的延长胆囊组织中中性粒细胞浸润越明显,炎症也就越重,最终导致胆囊组织损伤加重,解除胆总管梗阻可减轻胆囊炎症损伤。3胆总管梗阻后导致急性胆囊炎症,随着胆总管梗阻时间的延长,胆囊的炎症逐渐加重,胆总管梗阻解除后胆囊炎症逐渐减轻,梗阻解除越早,炎症恢复越快。
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