背景 结核病是目前严重威胁人类健康的主要传染病之一。目前全球有三分之一的人口感染了结核分枝杆菌；我国感染者为4亿人，死亡率为所有传染病死亡总和的两倍。结核病的致病菌是结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)。目前，有效的抗结核病药物是以异烟肼为代表的化疗药物，曾对结核病的控制、治疗产生极大的推动作用；但从上世纪80年末以来，由于MTB的多耐药菌株的增加和与HIV的共感染使结核病又将成为不治之症，现人们都在亟待寻找有效抑制MTB的药物。 导师根据老中医经验方，主要由白及、百部、川贝、三七、薏苡仁、红大戟等中药组成，经过近十年的剂型和临床及实验研究，研制出治疗结核病的有效药物——抗痨颗粒：经实验研究证明具有显著的对H37RV、MTB抑制作用，通过临床治疗空洞型肺结核及耐多药结核分枝杆菌患者疗效观察，其特点作用快、疗效好、疗程短和无毒副作用。但对于中药对结核分枝杆菌和耐多药结核分枝杆菌的抑制作用机理目前尚不清楚。 目的 本研究应用蛋白质组学的双向电泳技术，比较分析抗痨颗粒提取物作用前后耐多药结核分枝杆菌的全菌蛋白表达差异，从微生物的蛋白全局变化进行分析，有利于对药物作用机理进行更深入地研究，了解药物作用的最终靶标和具体起作用的成份，对新的药物靶标的发现和新药开发都有非常重要的作用。 方法 以耐多药结核分枝杆菌临床分离株作为研究对象，体外37℃7H9培养基培养，达到对数生长期后药物加入培养基作用20小时，分别提取药物作用前和作用后的全菌蛋白。采用双向凝胶电泳分离药物未作用和药物作用后的全菌总蛋白，银染，PDQuest 6.0软件进行图像分析，得到差异表达的蛋白质点。选中的每个蛋白质斑点与动态2D-电泳数据库(www．mpiib-birlin．mpg．de/2D-PAGE)进行分析比较。结果1 获得重复性和分辨率较好的药物作用前和作用后的双向凝胶电泳图谱：用PDQuest6.0软件对药物作用前后的2-DE图谱进行对比分析，发现了8个差异斑点。 2 对2-DE凝胶上药物作用后表达明显下调的4个蛋白质斑点与2D-电泳数据库(www.mpiib-birlin．mpg．de/2D-PAGE)进行分析比较，确定其中两个蛋白质为：硫代硫酸硫转移酶(thiosulfate sulfurtransferase)和假定蛋白Rv0634A。 结论 1 获得重复性和分辨率较好的药物作用前和作用后的双向凝胶电泳图谱。 2 发现了8个差异斑点，与2D-电泳数据库(www．mpiib-birlin．mpg．de/2D-PAGE)进行分析比较，确定其中两个蛋白质为：硫代硫酸硫转移酶(thiosulfatesulfurtransferase)和假定蛋白Rv0634A。 3 抗痨颗粒作用前后的耐多药结核分枝杆菌的全菌蛋白表达变化揭示了抗痨颗粒对耐多药结核分枝杆菌的翻译，结构组成，氨基酸代谢，氰化物和H<,2>S的解毒以及硫和铁转移等各方面均有一定影响，从而破坏结核分枝杆菌的生活能力，达到消灭结核分枝杆菌，治疗结核病的目的。