论文部分内容阅读
目的以SGC7901细胞为模型研究冬凌草甲素的抗癌机制,为进一步开发利用二萜类药物抗癌奠定一定基础。方法MTT检测冬凌草甲素对人消化道癌细胞SGC7901生长抑制作用；形态学观察不同浓度冬凌草甲素处理前后细胞的形态学变化；Hoechst染色分析冬凌草甲素对细胞的凋亡作用；流式细胞术分析了不同浓度药物处理细胞后的凋亡率及细胞周期分布。western blotting检测不同浓度药物处理前后细胞中NF-κB和p-JNK蛋白的表达情况以及使用PDTC抑制NF-κB后p-JNK的表达情况。结果(1)MTT试验结果显示,冬凌草甲素抑制人胃癌细胞SGC7901的生长,且呈浓度-时间依赖性,24h半数抑制浓度约为24μM,与对照组相比,40μM的冬凌草甲素作用60h抑制率达92.92±3.31%(P<O.05);(2)冬凌草甲素作用后倒置显微镜下观察显示,药物作用组细胞数明显减少,细胞皱缩、变圆、与邻近细胞分离,多为单个分布,其中部分脱离培养板而呈漂浮状。(3)相应的应用Hoechst染色方法进一步检测了药物作用后细胞凋亡情况,荧光显微镜下,药物组可观察到部分细胞凋亡的表现如细胞皱缩、染色质浓缩、边集、核碎裂等细胞凋亡特征,而阴性对照组所有细胞染色均匀。(4)流式细胞术对细胞周期情况进行分析的结果显示,SGC7901细胞经冬凌草甲素处理后G0/G1期细胞明显增加,G2期细胞明显减少,S期细胞无明显改变,表现出了G0/G1期阻滞；且在随着药物浓度增加出现不同程度的凋亡峰。(5)冬凌草甲素下调SGC7901细胞中NF-κB, P-JNK蛋白,并呈浓度依赖性。(6)NF-κB的抑制剂PDTC作用后,P-JNK的表达减少。结论冬凌草甲素抑制胃癌细胞SGC7901生长的机制是：冬凌草甲素诱导细胞凋亡和周期G0/G1阻滞,下调NF-κB的表达,以及NF-κB下调p-JNK的表达。冬凌草甲素抑制胃癌细胞SGC7901的生长呈浓度-时间依赖性。