【摘 要】
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尿液中的芳香类代谢物主要来源于肠道内消化吸收的芳香族氨基酸或者多酚类物质。芳香族氨基酸主要包括色氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸。本论文选取了29种与这些芳香族氨基酸代谢途
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尿液中的芳香类代谢物主要来源于肠道内消化吸收的芳香族氨基酸或者多酚类物质。芳香族氨基酸主要包括色氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸。本论文选取了29种与这些芳香族氨基酸代谢途径相关的代谢物进行了液相色谱-质谱(LC-MS)定量分析方法探索,并建立了定量标准曲线。同时,本论文采用多维核磁共振(NMR)技术对其中一种不稳定代谢物吲哚丙酮酸在不同溶剂中的存在形式以及降解产物进行了研究。主要内容包括:1.本论文比较了芳香类代谢物在3个不同厂家的色谱柱上的分离效果以及温度对物质分离的影响。我们发现Agilent C18色谱柱对这类物质的分离效果最好,色谱峰分布均匀。温度升高,物质的保留时间略微减小,某些比较难分离的物质分离度增大。同时,我们也优化了质谱参数,使得每一种物质在质谱中的响应信号最大。在优化好的色谱分离方法和质谱条件下我们建立了29种芳香类代谢物的LC-MS定量标准曲线。2.本论文采用多维NMR技术分析了吲哚丙酮酸在不同溶剂中的存在形式以及降解产物。研究发现,吲哚丙酮酸在乙腈溶液中主要以烯醇式结构存在,在水溶液中主要以酮式结构存在。烯醇式吲哚丙酮酸在乙腈溶液中会有少部分与氧气作用生成吲哚甲醛和乙二酸,有水存在时会加快这种反应。酮式吲哚丙酮酸在中性或碱性水溶液中不稳定,容易与氧气反应生成吲哚乙酸和二氧化碳。4-羟基苯丙酮酸在水溶液中也会发生类似的反应生成4-羟基苯甲醛和4-羟基苯乙酸,同时利用2D NMR谱图还归属出4-羟基扁桃酸的信号。这些结果表明芳香类丙酮酸在水溶液中不能稳定存在并且能以还原剂的形式与氧气发生多种反应。
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