皮肤撕脱伤是整形外科常见创伤之一，撕脱组织继发性坏死机理的不明及对撕脱组织血运缺乏有效的判断方法，是目前影响其救治效果的重要原因。本课题通过对皮肤撕脱伤撕脱组织和血液中粘附分子表达的研究，来进一步探讨撕脱组织继发性坏死的机理，为皮肤撕脱伤的临床救治提供一定意义的理论指导。同时研制用于组织循环判断的第二代荧光皮肤血流仪，用以解决撕脱组织血运判断缺乏有效方法的问题。 实验中将实验动物随机分为两组，一组通过模型机复制猪皮肤撕脱伤(撕脱组)，造成猪后肢皮肤撕脱创伤，随后于受伤部位经手术形成—12×4cm、蒂在肢体近端的任意型皮瓣；另一组不经撕脱创伤(对照组)，直接通过手术于猪后肢形成—12×4cm、蒂在肢体近端的任意型皮瓣。分别于创伤后0、2、6、12、24小时采集标本(组织和血样)。新鲜组织经液氮冻存备用；外周血中中性粒细胞采用多聚葡萄糖法提纯，PBS清洗后配成中性粒细胞悬液，用涂片机制成细胞涂片备用。1、用髓过氧化物酶法间接测定组织中中性粒细胞的侵润状况。2、用PCR反转录扩增的方法对各时间点组织标本中的CDlSmRNA进行半定量测定。3、用SP法对各时间点组织中ICAM-1及各时间点外周血中性粒细胞膜表面的CD11b进行组化分析，结果采用华海公司真彩医学图像分析系统处理，进行半定量分析。结果显示：在撕脱伤早期，粘附分子CD18、CD11b、ICAM-1表达明显高于对照组(P<0.05)，伤后12小时左右达峰值，随后有所下降。中性粒细胞的侵润与上述指标的变化趋势一致。上述结果提示：在皮肤撕脱伤早期，粘附分子的表达非常活跃，参与介导了中性粒细胞的侵润及中性粒细胞与内皮细胞粘附，从而引发一系列的组织损伤，导致撕脱组织的继发性坏死。因而推测，在皮肤撕脱伤早期，有针对性地应用粘附分子单克隆抗体或其他抑制剂，将有助于减轻皮肤撕脱伤皮瓣继发性坏死的程 第四军医大学硕士学位论文 一 度，提高皮肤撕脱伤的临床治疗效果。 针对皮肤撕脱伤撕脱组织血运判断缺乏有效手段的问题，我们研制了 用于组织循环判断的第二代荧光皮肤血流仪。该仪器的设计是利用传统荧 光法的基本原理，将荧光素钠注入人体静脉后，荧光素钠随血流分布到全 身，并渗出血管进入组织间隙，组织中荧光素钠含量与局部血流量成正比， 该仪器通过滤光片将激发光限定为特定波长的激发光，照射（注射了荧光 素钠的）组织后，产生黄绿色荧光，再经滤光片形成特定波长的反射光信 号，经光电倍增管转换为电信号并放大后，用计数器计数，数值的大小反 映体内荧光素钠的浓度，从而间接反映了局部组织的循环状况，该仪器的 应用克服了传统荧光法的诸多缺点。随后我们进行了一系列的实验验证： l、探索并绘制了荧光素钠浓度与血流仪DF值间关系的曲线图。2、以家 兔为研究对象，探索了荧光素钠的最佳应用剂量及其在兔体内的衰变规 律。3、研究探讨了皮瓣组织循环状况与荧光皮肤血流仪DFI值的关系。 结果证实，该仪器最佳测量范围为 IX 10”乙IX 10”’g／Inl；4mg／kg为荧光素 钠的最佳给药剂量；给药后20分钟是荧光皮肤血流仪的最佳检测时间； 当血流仪的DFI值360％组织肯定成活，而DFI值＜25％组织将发生坏死， DFI值介于25％～60％为交界区域。该仪器的研制成功及相关参数的获取 将为皮肤撕脱伤撕脱组织血运的判断及外科其他领域组织循环的判定提 供一种方便、安全、灵敏、可靠的检测手段，有着广阔的应用前景。