研究背景：我们生活的世界是一个在不停变化的世界。这些变化多数是有规律的周期性变化。这种节律性变化不但存在于人及动物体内，同时也存在于正常以及人和动物的肿瘤细胞内。因此充分了解正常及肿瘤组织的节律差异，将会使我们更合理的选择用药时间，以达到提高药物对肿瘤细胞的选择性，同时减少对正常组织细胞的杀伤作用。环磷酰胺、顺铂是临床常用的非选择性烷化剂。两药因具有抗瘤谱广、作用强的特点常联合用于多种癌症的治疗。但因其选择性差，常常导致严重的副作用，如骨髓抑制、肾脏毒性及消化道反应。在治疗的同时也给患者在身体上、精神上带来了极大的痛苦。 目的：本研究旨在探索两药合用的最佳给药时间，以期为临床癌症化疗提供必要的理论依据。方法：1．小鼠按昼夜六个不同时间点（10、14、18、22、02、06h）分别给予环磷酰胺(20mg·kg^-1)和顺铂(2mg·kg^-1)，以抑瘤率、外周血象、体重及血清BUN含量为指标，考察环磷酰胺、顺铂单独用药药效及毒性反应的昼夜节律变化。2．小鼠按昼夜六个不同时间点（10、14、18、22、02、06h）给予环磷酰胺(20-40mg·kg^-1)，各给药组统一在每日18h给予顺铂(2mg·kg^-1)一次进行联合化疗，以考察两药联合化疗不同时间给予环磷酰胺毒性反应的时间依赖性。以外周血细胞计数、紫外分光光度法及生化方法考察骨髓抑制及肾脏损伤的时间依赖性；采用流氏细胞术分别考察了小鼠S₁₈₀肿瘤细胞、正常及化疗后小鼠骨髓细胞周期的昼夜节律变化；运用Western blotting方法测定正常及化疗小鼠骨髓细胞凋亡相关蛋白p53、bcl-2蛋白表达的昼夜节律；单细胞凝胶电泳技术考察不同时间用药对外周血淋巴细胞DNA损伤的情况。3．小鼠按昼夜六个不同时间点给予顺铂(2mg·kg^-1)，各给药组统一在每日18h给予环磷酰胺(20mg·kg^-1)进行联合化疗，以考察两药联合化疗不同时间给予顺铂毒性反应的时间依赖性。小鼠的死亡率、血象的改变、骨髓DNA含量及肾脏损伤等毒性反应的时间依赖性。结果：1．环磷酰胺、顺铂单独用药均为18：00给药副作用最小。2．两药联合化疗环磷酰胺10h给药小鼠的死亡率，体重下降的百分率及对外周血象、骨髓DNA含量的抑制作用均最大，18h给药抑制作用最小；小鼠S₁₈₀肿瘤细胞DNA合成高峰期在6-10h，低谷期在14h、2h。正常小鼠骨髓细胞DNA合成高峰期在10：00h，低谷期在02h；化疗后DNA合成的高峰期在02h，谷值在18：00h。其中10：00h给药对S期的抑制作用最大减少了38％；正常小鼠骨髓细胞p53、bcl-2蛋白表达均在18：00h最强，22：00h最弱。化疗后P53蛋白在22：00h