血吸虫病是一种由血吸虫引发的可以感染人和多种哺乳动物的重要传染病,主要在发展中国家和偏远地区流行,感染者多达两亿五千八百万人,在流行国家和地区具有显著的医学和经济学意义。由于缺乏有效的针对血吸虫的疫苗,目前化学治疗是控制血吸虫病的主要策略,其中吡喹酮(PZQ)对感染人体的五种血吸虫引起的感染均有效果。但是,对PZQ的依赖和广泛使用也增加了其耐药性产生的风险。因此亟需寻找一种能够阻断血吸虫传播并且能够抗血吸虫生殖的疫苗或药物。本研究的目的是从化合物Imatinib、Disulfiram及根据该化合物的结构设计的五种衍生物、化合物1o、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶抑制剂SBI-0797750.0003、五种联芳基烷基羧酸衍生物(BACADs)等十四种化合物中,从中筛选出高效的抗日本血吸虫成虫的侯选药物。方法是在体外条件下,培养日本血吸虫成虫,通过倒置显微镜观察其对成虫的形态学、雌雄虫合抱稳定性、运动性、雌虫产卵量的影响以及通过共聚焦显微镜(CLSM)检测雌雄虫性腺等内部器官的病理变化,再通过统计学分析对以上化合物的抗日本血吸虫成虫的药效进行评估。研究发现:(1)Imatinib体外抗日本血吸虫成虫药效的研究Imatinib在体外可引发一系列地生理变化,如日本血吸虫成虫形态学变化、配对稳定性和成虫运动性降低,而且在体外培养3-5 d期间,表现出较好地杀日本血吸虫成虫的效果。除此之外,CLSM的结果显示,Imatinib还可引起日本血吸虫成虫性腺、胃肠道表皮等部位的病理变化。(2)Disulfiram及其五种衍生物体外抗日本血吸虫成虫药效的研究暴露于Disulfiram衍生物的日本血吸虫成虫除了发生严重的形态学变化,还表现出运动性和雌雄虫合抱稳定性降低等现象。而且在10μM条件下,GR250和GR332处理的实验组,在3 d内可导致10%-20%的雌虫死亡。(3)SBI-0797750.0003体外抗日本血吸虫成虫药效的研究SBI-0797750.0003可引起虫体严重的形态学变化,包括表皮起泡、肠道膨胀等;还可引起与生殖相关的变化,如降低雌虫的产卵量以及雌虫子宫内虫卵堵塞;除此之外,在整个72 h的培养期内,暴露于SBI-0797750.0003的日本血吸虫成虫表现出运动性降低的现象,100μM SBI-0797750.0003培养48 h或50μM培养72 h均可达到100%的致死率。(4)化合物1o体外抗日本血吸虫成虫药效的研究在含有50μM和100μM化合物1o培养48 h时,虫体出现了轻微的肠道膨胀以及在肠道内发现黑色的碎片,除此之外并没有引起其他的形态学变化。而且碎片样的物质在培养基中也有出现,我们推测这可能是由于培养基中的某种化学物质与化合物1o发生了一些化学反应,但这需要进一步验证。(5)五种联芳基烷基羧酸衍生物(BACADs)体外抗日本血吸虫成虫药效的研究五种BACADs可以引起多样的和显著的表型变化,如雌虫子宫内虫卵堵塞、肠道扩张以及肿瘤样结构的生长。同时,BACADs还可引发日本血吸虫成虫的死亡(Schl 36093在100μM条件下48 h或50μM培养72 h均可导致100%的死亡率)。综上所述,本研究在体外培养条件下检测了一系列有前景的抗日本血吸虫成虫的候选化合物。研究结果表明,Imatinib、Disulfiram衍生物中的两种化合物GR250和GR332、SBI-0797750.0003、BACADs中的两种化合物Schl 36025和Schl 36093在体外具有广泛的抗日本血吸虫作用,包括运动能力下降、生殖缺陷以及性腺和胃肠表皮等,其中效果最好的化合物为Disulfiram衍生物中的两种化合物GR250和GR332,这两种化合物的致死浓度与PZQ的致死浓度(5μg/mL)极为相近。然而,这些候选化合物的潜在靶分子尚不清楚,在未来的研究中应该明确其靶标分子,并为开发针对不同发育阶段血吸虫病的合理药物奠定基础。