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目的:通过收集临床慢性阻塞性肺疾病病例并进行中医辨证分型,进行肺功能指标检测,采集血液样本进行T淋巴细胞亚群相关细胞因子的流式细胞术分析,对慢性阻塞性肺疾病的中医证型分布及与肺功能指标,T淋巴亚群相关细胞因子的关系进行初步探讨,同时比较慢性阻塞性肺疾病病人和未患慢性阻塞性肺疾病受试者之间的肺功能与T淋巴细胞亚群相关细胞因子的差异,统计分析肺功能指标和T淋巴细胞亚群相关细胞因子的相关性,以期为慢性阻塞性肺疾病的临床辨证分型提供参考依据。方法:选取2017年3月-2017年7月广东省中医院、广东省第二中医院呼吸内科门诊和住院治疗的符合纳入标准的慢性阻塞性肺疾病患者115例,运用中医四诊及症状体征等对所收集的慢性阻塞性肺疾病病例进行证候分组,分别设为外寒内饮证组、风寒束肺证组、痰湿阻肺证组、痰热壅肺证组、肺肾气虚证组、肺肾气阴两虚证组、脾肺气虚证组、气虚血瘀证组这8个证型组,同期体检未患慢性阻塞性肺疾病的正常人20例设置为正常对照组,并对完整参与后续肺功能检测和T淋巴细胞亚群指标检测的80例慢性阻塞性肺疾病患者和20例未患慢性阻塞性肺疾病正常人受试者进行用力肺活量占预计值百分比(FVC%)、第一秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)及第一秒用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV1/FVC)的肺功能指标检测,以及Th17细胞分数、Treg细胞分数、IL-22+细胞分数、Th22细胞分数的流式细胞术检测。比较分析各组间肺功能和T淋巴细胞亚群指标的差异,并分析肺功能指标和T淋巴细胞亚群相关细胞因子之间是否存在相关性。结果:(一)收集到的115例慢性阻塞性肺疾病患者的中医证候辨证分型结果如下:风寒束肺证2例,占1.74%;痰热壅肺证22例,占19.13%;外寒内饮证1例,占0.87%;痰湿阻肺证29例,占25.22%;脾肾气虚证23例,占20.00%;脾肺气虚证21例,占18.26%;肺肾气阴两虚证6例,占5.22%;气虚血瘀证I1例,占9.57%。(二)共有80例慢性阻塞性肺疾病受试者参与了后续肺功能检测与完整T淋巴细胞亚群检测,其中:风寒束肺证1例,占1.25%;外寒内饮证0例,占0.00%;痰热壅肺证19例,占23.75%;痰湿阻肺证20例,占25.00%;脾肾气虚证19例,占23.75%;脾肺气虚证17例,占21.25%;肺肾气阴两虚证1例,占1.25%;气虚血瘀证3例,占3.75%。因后续“外寒内饮证”、“风寒束肺证”、“肺肾气阴两虚证”、“气虚血瘀证”观察到的病例数太少难以进行统计分析,故选择“痰热壅肺证”“痰湿阻肺证”“脾肺气虚证”“肺肾气虚证”4组进行比较分析。肺功能检测发现:4组受试者FVC%相比,差异无统计学意义(P>0.05),痰湿阻肺证组与痰热壅肺证组FEV1%、FEV1/FVC相比,差异无统计学意义(P>0.05);肺肾气虚证组受试患者FEV1%、FEV1/FVC低于痰湿阻肺证组、痰热壅肺证组与脾肺气虚证组(P<0.05),脾肺气虚证组受试者FEV1%、FEVI/FVC低于痰湿阻肺证组与痰热壅肺证组(P<0.05)。FEV1/FVC与FEV1%按照痰湿阻肺证组=痰热壅肺证组>脾肺气虚证组>肺肾气虚证组分布,呈较明显的递减趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。不同证候组间T淋巴细胞亚群相关细胞因子的比较:痰湿阻肺证组与痰热壅肺证组Treg细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值、Th22细胞分数、IL-22+细胞分数相比,差异无统计意义(P>0.05);痰热壅肺证组Th17细胞分数高于痰湿阻肺证组,差异有统计学意义(P<0.05);肺肾气虚证组与脾肺气虚证组慢性阻塞性肺疾病患者外周血Th17细胞分数、Treg细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值、Th22细胞分数、IL-22+细胞分数相比,差异无统计意义(P>0.05);与痰热壅肺证组和痰湿阻肺证组相比,肺肾气虚证组与脾肺气虚证组慢性阻塞性肺疾病受试患者外周血Th17细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值、Th22细胞分数、IL-22+细胞分数均低于痰热壅肺证组与痰湿阻肺证组(P<0.05),Treg细胞分数高于于痰热壅肺证组与痰湿阻肺证组(P<0.05).(三)将80例慢性阻塞性肺疾病受试者与20例正常未患慢性阻塞性肺疾病的受试者的相关检测指标进行比较。因后续“外寒内饮证”、“风寒束肺证”、“肺肾气阴两虚证”、“气虚血瘀证”观察到的病例数太少难以进行统计分析,故按照“邪气盛则实,精气夺则虚”理论,将外寒内饮证组,风寒束肺证组,痰热壅肺证组,痰湿阻肺证组设为偏实证组;将脾肺气虚证组,肺肾气虚证组,肺肾气阴两虚证组,气虚血瘀证组设为偏虚证组。正常未患慢性阻塞性肺疾病受试者设为正常对照组。肺功能检测发现:3组受试者FVC%相比,差异无统计意义(P>0.05),偏虚证组受试者FEV1%、FEV1/FVC低于偏实证组与正常对照组(P>0.05),偏实证组受试者FEV1%、FEV1/FVC低于正常对照组(P<0.05)。FEV1/FVC与FEV1%按照偏虚证组<偏实证组<正常对照组分布,呈明显递增趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。T淋巴细胞亚群相关细胞因子比较:3组受试者外周血Th17细胞分数、Treg细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值、Th22细胞分数、IL-22+细胞分数比较,差异有统计意义(P<0.05)。偏实证组慢性阻塞性肺疾病受试患者外周血Th17细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值、Th22细胞分数、IL-22+细胞分数均高于正常对照组与偏虚证组(P<0.05),Treg细胞分数低于于正常对照组与偏虚证组(P<0.05)。偏虚证组慢性阻塞性肺疾病受试患者外周血Th17细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值、Th22细胞分数、IL-22+细胞分数均高于正常对照组,Treg细胞分数低于正常对照组(P<0.05)。Treg细胞分数按偏实证组<偏虚证组<正常对照组趋势分布,Th17细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值、Th22细胞分数、IL-22+细胞分数按正常对照组<偏虚证组<偏实证组趋势分布。(四)肺功能指标与T淋巴细胞亚群细胞分数相关性分析:Pearson相关性分析结果显示,外周血Treg细胞分数与FEV1%、FEV1/FVC呈正相关(P<0.01),Th17细胞分数、Th17/Treg细胞比值、IL-22+细胞分数、Th22细胞分数与FEV1/FVC、FEV1%呈负相关(P<0.01)结论:在设置的8个证型中,慢性阻塞性肺疾病患者中医证型分布以痰热壅肺证、痰湿阻肺证、脾肺气虚证、肺肾气虚证所占比例较大,提示在慢性阻塞性肺疾病患者本身病情发展中,本身精气虚以气虚为主,标实以痰饮为主,气虚与痰饮交织为患,进行性发展。肺功能按痰热壅肺证组=痰湿阻肺证组>脾肺气虚证组>肺肾气虚证组分布,呈明显递减趋势,提示受试者由未患慢性阻塞性肺疾病的正常对照组到实证组再到虚证组,随着病情发展,气虚程度逐渐加重,肺功能也不断下降,因此,肺功能指标或可作为慢性阻塞性肺疾病临床中医辨证的参考指标之一。肺肾气虚证组与脾肺气虚证组慢性阻塞性肺疾病受试患者外周血Th17细胞/Treg细胞比值、Th17细胞分数、Th22细胞分数、IL-22+细胞分数均低于痰热壅肺证组与痰湿阻肺证组(P<0.05),Treg细胞分数高于痰热壅肺证组与痰湿阻肺证组(P<0.05),提示慢性阻塞性肺疾病病情在实证的痰热壅肺证和痰湿阻肺证时,炎症反应与免疫失衡相对加重,促炎症因子Th17所占比例增多而介导免疫反应的Treg所占比例减少,Th22细胞分数与IL-22+细胞分数增高也提示了 IL-22在炎症反应与免疫失衡中亦起到了重要作用,是炎症反应与免疫失衡加重的原因之一。Th17细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值、Th22细胞分数、IL-22+细胞分数由对照组到虚证组再到实证组逐渐增大,持续存在的慢性炎症,自身免疫失衡与慢性阻塞性肺疾病病情变化密切相关,是导致慢性阻塞性肺疾病患者由“邪气盛”实证向“精气虚”的虚证转变的重要原因,T淋巴细胞亚群相关细胞因子与肺功能损伤相关。由于促炎症因子与介导自身免疫的细胞因子比例失衡,导致慢性阻塞性肺疾病患者持续存在的气道慢性炎症,或许是最终导致上皮细胞损伤甚至气道重塑,最终导致肺功能损伤的原因。相关T淋巴细胞亚群指标和肺功能指标可以作为临床中医辨证规范化的提供部分参考依据。