以啤酒酵母为酶源，催化—磷酸腺苷(AMP)生成三磷酸腺苷(ATP)，是最有工业前景的ATP生产方法之一。该方法目前存在的问题主要有：如何稳定细胞质量，优化生产工艺和提高规模效应。本文针对存在的问题，利用从啤酒厂生产现场取回的啤酒酵母，对影响酵母发酵制取ATP的反应条件、酵母代数、酵母通透性等问题进行了较深入的探讨和试验研究，同时，利用活性炭和离子交换树脂对发酵液进行了粗分离和精制，对后提取工艺进行了系统研究，最后，对ATP生产体系进行了环境评价。 通过正交设计，对影响发酵工艺的葡萄糖浓度、磷酸盐浓度、AMP含量、发酵液pH值、反应时间和反应温度进行了考察，并进一步研究了酵母用量、镁离子浓度和搅拌速度对发酵的影响，确定了用于ATP生产的最佳工艺条件为：葡萄糖浓度150mmol.L-1；磷酸盐浓度200mmol.L-1；AMP用量20g.L-1；发酵液pH为8.0；反应时间4h；反应温度35℃；酵母用量50g.L-1；硫酸镁浓度15mmol.L-1；搅拌速率为75rpm。 同时，比较了不同代数啤酒酵母和不同储存天数啤酒酵母的ATP生产活性，以及不同通透化处理方式对酵母生产活性的影响。结果表明，前发酵的第一、二代酵母生产活性较高；酵母泥直接用于发酵时，需要冰冻储存一段时间才能使用，储存时间在第5至第10天之间时，酵母的生产活性较好，丙酮处理过的酵母生产活性最高，AMP转化率能达到89％。 在活性炭对发酵液的粗分离工艺中，对不同型号活性炭进行了筛选，广西人学仙］学位论义 川」’呐丫们十，人／厂仑＊，（并考察了上活性炭柱的发酵液PH值。浓度和上桩流速对活性炭吸附性能的影响，并讨论了洗脱液流速和洗脱液配比对分离效果的影响。归纳出活性炭分离部分的适宜工艺条件为：上柱液叫为3，浓129·厂，上桩流速0．09BV．m i n’，洗脱 液最佳酉卜：氨水：95％乙醇：蒸馏 水为 2：5：3 体积比），洗脱流速为 0．23BV·m i n’。 采用离子交换树脂从粗提液中分离提耿ATP，对不同型号树脂进行筛选，并考察了上桩腋浓度，PH值和上桩流速对吸附的影响，较适宜的上桩工艺为：上桩液浓度 15n·L，nH为 8．0，流速 0．07BV．m i n’，采用两套洗脱系统H l／Nao和 HAc／NaAc洗脱分离，变换其中洗脱液酉卜，对离子交换桩进行分步洗脱，最后得到比较好的分离效果，适宜的洗脱工艺条件为：0．01 mmo．L、HAc／0．07mmo．L’NaAc 洗脱出 洲P；0．16mmol．L’HAc／0．36mmol．L NaAc洗脱ADP；0．25mmol．L’HCI／0．75mmol．L＂ NaCI 洗月ATP，洗脱流速 0．旧BV．m i n’。产品的紫外波长扫描图谱、红外光谱、高效液相色谱均与标准品的图谱一致。 对ATP生产过程的环境影响进行了简要评价，并提出一系列初步处理建议，为将来的清洁生产打下基础。