白屈菜碱的分离提取及其联合毒力作用研究

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天然植物体内存在很多具有活性的物质,其中白屈菜在我国分布广泛,主要活性物质包括白屈菜碱、白屈菜红碱和小檗碱等,均具有多种生物活性。本研究选择白屈菜作为研究对象,并利用大孔吸附树脂对其粗提取物进行提取分离富集,以舞毒蛾(Lymantria dispar)3龄幼虫作为供试昆虫,通过室内毒力测定,计算出毒力回归方程和致死中浓度(LC5o),并与95%高效百树菊酯、93.8%11吡虫啉和94.3%灭幼脲三种化学药剂两两复配,筛选出其中的增效组合,并确定出增效组合的最佳配比,旨在探明植物源农药的增效作用,减少传统农药的使用,为开发出安全、高效、环境兼容性好的新型植物源农药提供理论依据。采用索氏提取法、冷浸法和超声波提取法制备白屈菜粗提物,并通过胃毒法和触杀法对舞毒蛾3龄幼虫进行室内毒力测定,结果表明,三种处理方法得到的粗提取物胃毒活性优于触杀活性,但幼虫死亡较缓慢,一般在48 h后才有轻微作用,其中索氏提取法效果稍好一些,药液浓度250μg/mL时,胃毒效果最好,死亡率达到36.67%,药液浓度200μg/mL时,触杀效果最好,死亡率达到38.33%。为了可以进一步分离提纯和富集白屈菜粗提物中的白屈菜碱,选择九种理化性质各异的大孔吸附树脂进行试验。采用静态吸附和解吸以及动态吸附、梯度洗脱和等度洗脱筛选出效果最佳的大孔吸附树脂。结果表明,D-101树脂吸附效果明显好于其他几种大孔吸附树脂,最终吸附条件:样品溶液300 mL(30BV),流速1.0 mL, pH值2.0,温度25℃;梯度洗脱条件:20%乙醇40 mL (4BV),然后70%乙醇120 mL (12BV),流速1.0 mL。经过大孔树脂进一步分离提纯可将白屈菜碱提取率从2.67%提高到21.48%。在上述试验的基础上,初步探究白屈菜碱的联合毒力作用,选择自己分离纯化的21.48%白屈菜碱以及95%高效百树菊酯、93.8%吡虫啉和94.3%灭幼脲作为原药,通过室内毒力测定结果,计算协同毒力指数(c.f)。从中筛选出21.48%白屈菜碱+94.3%灭幼脲这一组增效组合,该组合协同毒力指数(c.f)为21.46,进而利用毒性比率指标确定增效组合的最佳配比,结果发现,以1:4进行复配,增效作用最好,毒性比率达到1.21,为减少传统化学农药的使用提供了可能。
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