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第一部分 2型糖尿病大鼠模型的建立
[目的]用高脂饲料诱导和小剂量STZ(链脲菌素)腹腔内注射制备2型糖尿病大鼠模型。
[方法]SPF级雄性Wistar大鼠45只随机分为正常对照(NG)组8只和糖尿病(DM)组37只,NG组以标准大鼠饲料喂养,DM组则以高脂饲料喂养,两组均饮用大鼠专用去离子水,16周进行高胰岛素.正常血糖钳夹实验,在确定胰岛素抵抗后腹腔注射STZ(20mg/kg)促发高血糖。实验过程中每周测食量、水量和体重,每4周测血糖,实验16周取血测空腹血浆胰岛素。
[结果]试验中DM组有2只大鼠死亡,共43只大鼠进入数据分析。饲喂高脂饲料16周,DM组空腹胰岛素浓度明显高于NG组;与NG组相比,DM组葡萄糖输注速率(GIR)明显降低,两组差异有统计学意义;STZ注射后DM组出现了饮食量饮水量的增加和体重的下降,DM组血糖明显升高,达到了2型糖尿病的成模标准。
[结论]高脂饲喂配合小剂量STZ腹腔注射可作为研究2型糖尿病大鼠模型的方法。
第二部分刺梨叶对2型糖尿病大鼠的治疗作用及机制初探
[目的]观察刺梨叶对2型糖尿病大鼠的治疗作用,并从氧化应激角度探索其治疗作用的可能机制。
[方法]选用2型糖尿病成模大鼠和正常大鼠共37只,随机分为5组:正常对照组(NG),糖尿病模型组(MG)、二甲双胍治疗组(MET)、刺梨叶水提物低(LD)和高剂量组(HD)。NG组以标准大鼠饲料喂养,其他各组则以高脂饲料喂养,均饮用大鼠专用去离子水,MET组给予二甲双胍160mg/kg,LD组和HD组分别按250mg/kgW和500mg/kgW给药,上述药物均以自然饮水法给药,食水充足供应,实验周期为5周。实验中每天测饮食量和饮水量,每周测体重和血糖,实验结束前进行口服糖耐量实验(OGTT),留血样测T-CHO、rG、LDL、HDL、 NEFA、GSP、SOD和MDA。取枕叶大脑皮层、左心室及胰腺组织用于检测SOD和MDA含量,并进行顶叶皮层和海马CA1区免疫组织化学染色,观察β淀粉样肽的表达。
[结果]与NG组相比较,各周MG组血糖值明显升高。与MG组相比,第4周时LD组血糖值开始出现明显的下降,至第5周时LD组和HD组血糖下降更为明显。
与NG组相比较,MG组T-CHO、TG、LDL和NEFA明显增高。与相应MG组相比较,MET组、LD组和HD组T-CHO及MET组、LD组LDL出现明显下降。
与NG组相比,MG组大鼠血浆和枕叶大脑皮层、胰腺及左心室组织匀浆SOD值明显降低而MDA值明显增高。与MG组相比,LD组和HD组血浆、枕叶大脑皮层、胰腺和左心室组织出现了SOD的升高趋势和MDA值的明显下降。
[结论]
1.首次将刺梨叶应用于糖尿病的治疗学研究领域;一定剂量的刺梨叶能对2型糖尿病大鼠起治疗作用并对大脑,心脏和胰腺等器官有保护作用。
2.刺梨叶的抗氧化应激活性可能是其对2型糖尿病大鼠起治疗作用的机制之一。