小鼠胚体成纤维细胞的培养是制备饲养层的重要途径,其制备、传代及冷冻保存均有不同的研究报道,饲养层的质量受许多因素的影响,如动物的品种、培养液、所传代数及实验条件等,关于饲养层制备过程中的胚体细胞培养、传代、冷冻后的细胞形态、组织学等方面的研究报道很少,故本实验以昆明小白鼠为实验动物,研究其胚体培养过程中细胞的形态学、组织学等方面的变化,以期为本实验室建立饲养层细胞库提供理论依据.同时探讨心肌细胞和成纤维细胞层共培养的可行性,以期为心脏生物学特性的体外研究奠定基础.研究结果表明:(1)用不同日龄小鼠胚胎(11~16d)分离培养成纤维细胞,其生长状况、铺层时间及寿命以13d、14d小鼠胚胎效果最佳.(2)体外培养的原代小鼠胚体成纤维细胞随培养时间的增加,核质比逐渐增加.(3)胚胎冷冻法可以使成纤维细胞取得较好的冷冻保存效果,解冻活率最高可达0.86.降温速率可以加快到0.60~1.0℃/hmin,平衡时间以2~2.5h为宜.(4)小鼠胚体成纤维细胞可以与心肌细胞团共培养,并出现自律性收缩,细胞团逐渐增长,其收缩情况随温度变化而变化,随时间变化其形态学发生变化,而且并非所有心肌细胞团都能收缩.