中枢神经系统(CNS)损伤后轴突难以再生的原因之一是轴突再生抑制性因子的存在,目前发现的主要有Nogo-A、MAG和OMgP,它们通过一个共同的受体(NgR),在P75NTR的参与下,通过激活RhoA进而发挥神经抑制作用,RhoA是轴突再生抑制性因子作用的重要靶点。本实验采用RNA干涉技术使RhoA基因沉默,阻断抑制因子的传导通路,RNA干涉小发夹抑制内源性RhoA基因在少突胶质细胞中的表达,促进中枢神经轴突再生,应用real time RT-PCR﹑Western-Blot方法检测内源性RhoA基因沉默效果。结果表明,RNA干涉小发夹有效地沉默了RhoA基因。体内实验表明,从RhoA的mRNA水平和蛋白水平评价,特异性RhoA干涉小发夹抑制了RhoA在脊髓中的表达。同时脊髓损伤后轴突再生特异性蛋白GAP-43的表达上调,是神经轴突再生的可靠证据。实验证明,RhoA基因的抑制与损伤后脊髓的轴突再生有相关性,RNA干涉小发夹抑制RhoA基因的表达可以促进脊髓损伤的轴突再生。本实验就是利用siRNA具有高效性和高度特异性,成功关闭RhoA基因,有效阻断Rho传导通路,抑制了轴突再生抑制性因子的功能,改善了脊髓损伤区局部的微环境,从而促进中枢神经的轴突再生,探索一种研究及治疗脊髓损伤新方法。