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研究背景及目的系统性红斑狼疮（Systemic lupus erythematosus,SLE）作为自身免疫性疾病,可累及多个系统和器官。其中面部蝶形和盘状红斑为特异性皮疹,而不伴皮疹的患者早期容易被漏诊或误诊。此外,SLE患者中肾脏受累十分常见,超过半数的患者会并发狼疮性肾炎（Lupus nephritis,LN）,不同肾脏病理分型患者的临床表现、治疗方案、预后不尽相同。肾脏病变中最严重的临床表现是终末期肾病（End stage renal disease,ESRD）,也是SLE患者主要死因之一。即使规律使用激素并联合运用免疫抑制剂,仍有超过10%的LN患者会进展为ESRD。探讨LN患者的临床表现和病理学特征之间的联系,对提高临床预后判断和寻找有潜力的治疗靶点具有十分重要意义。作为SLE的易感基因,白细胞介素1受体相关激酶1（Inerleukin-1 receptor associated kinase 1,IRAK1）在SLE中外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cell,PBMC）高表达,可以促进SLE炎症反应。IRAK1是Toll样受体（Toll-like receptor,TLR）信号通路的关键成分,通过一系列的信号传导诱导核因子κB（Nuclear factor kappa-B,NF-κB）移入细胞核。TLR通路中还存在由IRAK1激活的丝裂原活化蛋白激酶（Mitogen-activated protein kinase,MAPK）通路。这两种通路均能诱导炎症性细胞因子的分泌。微小RNA（Micro RNA,miRNA）是一类非编码单链RNA分子,通过与靶基因m RNA的3’-UTR结合,导致靶基因翻译抑制或降低,参与转录后基因表达调控。寻找负调控IRAK1的miRNA对阐明SLE发病机制和发展有效的靶向治疗具有重要意义。为探讨SLE患者的临床特征、IRAK1及其上游目标miRNA在SLE中的价值,首先,本研究首先纳入305例SLE患者,分析伴和不伴面部面部蝶形和盘状红斑患者的临床特征异同,寻找不同疾病活动性和不同肾脏病理分型患者的临床特征差异,探索终末期肾病的危险因素,以期为早期识别、判断预后、指导干预措施提供理论基础。其次,通过生物信息学方法筛选出负调控IRAK1表达的目标miRNA,并分析SLE患者PBMC中目标miRNA和IRAK1的表达水平以及与临床指标之间的相关性。最后,用功能学实验验证目标miRNA是否可以通过IRAK1调控NF-κB/MAPK通路,为未来探索治疗靶标提供新启示。研究方法1、收集符合纳排标准的2013年1月至2018年12月于陆军军医大学第一附属医院住院,初次诊断为SLE并行肾脏穿刺活检的患者305例,并分别根据皮疹、活动性和肾脏病理类型进行分组。根据有无皮疹分为皮疹组和无皮疹组;根据疾病活动性分为活跃性SLE（SLEDAI评分≥10分）和非活跃性SLE（SLEDAI评分<10分）;根据肾脏病理分为LN-Ⅱ/Ⅴ型和LN-Ⅲ/Ⅳ（伴或不伴LN-Ⅴ）型。比较不同分组患者之间的临床特征,并分析终末期肾病的危险因素。2、通过生信分析预测靶向IRAK1的目标miRNA,并用双荧光素酶报告试验进行验证。其次,检测SLE患者及健康志愿者（Healthy control,HC）PBMC中目标miRNA、IRAK1、NF-κB/MAPK通路主要成分,以及细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的表达水平,并分析SLE患者目标miRNA和IRAK1与临床指标的相关性。最后,通过功能学实验进行验证目标miRNA靶向IRAK1在NF-κB/MAPK通路中的作用机制。研究结果1、305例患者中有148例（48.5%）的患者伴有面部蝶形/盘状红斑。男性和女性出现皮疹的概率,差异无统计学意义（P=0.148）。有69.0%的未成年发病患者（<18岁）出现过皮疹,显著高于成年发病患者（18-49岁）（45.6%）和迟发性患者（≥50岁）（23.8%）。皮疹组出现关节炎、发热、脱发和抗Sm抗体阳性的概率均高于无皮疹组,而出现水肿、血肌酐增高的发生率均低于无皮疹组（P<0.05）。2、305例患者中活动性SLE患者191例（62.6%）,非活动性SLE患者114例（37.4%）。与非活动性SLE患者相比,活动性患者更容易出现肾外表现（如浆膜炎、脱发、贫血、血小板减少）、肾脏损害（如血肌酐增高、血尿、进展为ESRD）以及自身抗体阳性（如抗ds-DNA、Anu A抗体）,P<0.05。3、305例LN患者中LN-Ⅲ/Ⅳ（伴或不伴LN-Ⅴ）型患者252例（82.6%）,LN-Ⅱ/Ⅴ型患者53例（17.4%）。LN-Ⅲ/Ⅳ（伴或不伴LN-Ⅴ）型患者出现肾外表现（脱发、浆膜炎、贫血）、肾脏损害（血尿、血肌酐增高、进展为ESRD）以及自身抗体阳性（抗ds-DNA、Anu A抗体）的比例均高于LN-Ⅱ/Ⅴ型患者（P<0.05）。此外,LN-Ⅲ/Ⅳ（伴或不伴LN-Ⅴ）型、抗ds DNA抗体阳性、血肌酐增高和SLEDAI评分≥10分均为ESRD的独立危险因素。4、与健康对照组相比,SLE患者PBMC中miRNA-589-5p表达水平降低,IRAK1的m RNA和蛋白表达水平均升高,NF-κB/MAPK通路异常激活（TRAF6、P38、P65、JNK的表达水平均高于HC,而IκBα的表达水平低于HC）,IL-6、TNF-α、IL-1β的分泌增加,P<0.05。5、在SLE中,miRNA-589-5p表达水平与IRAK1表达水平、SLEDAI评分及24h尿蛋白负相关（r=-0.853,r=-0.824,r=-0.477）,与补体C3正相关（r=0.549）,P<0.05。IRAK1与24h尿蛋白和SLEDAI评分正相关（r=0.811,r=0.699）,而与补体C3负相关（r=-0.500）,P<0.05。6、功能学实验表明,在过表达miRNA-589-5p的Jurkat细胞中,IRAK1、TRAF6、P65、JNK、P38、IL-6、TNF-α和IL-1β表达水平均降低,而IκBα表达水平升高,在低表达miRNA-589-5p的Jurkat细胞中,结果则相反,P<0.05。研究结论1、伴皮疹的SLE患者以肾外表现为主,而不伴皮疹的患者更易发生血肌酐增高;2、活动性SLE患者和LN-Ⅲ/Ⅳ（伴或不伴LN-Ⅴ）型患者更容易出现肾脏及肾外损害;LN-Ⅲ/Ⅳ（伴或不伴LN-Ⅴ）型、SLEDAI评分≥10分、抗ds DNA抗体阳性和血肌酐增高均为ESRD的独立危险因素。3、SLE患者PBMC中的IRAK1表达水平升高,而miRNA-589-5p表达水平降低,两者呈负相关;miRNA-589-5p表达减少和IRAK1表达增加与SLE疾病活跃、肾脏损害重相关;miRNA-589-5p能够通过靶向IRAK1 3’-UTR抑制NF-κB/MAPK通路的激活。