具有催化释放NO功能的金属有机框架(HKUST-1)涂层的制备及其生物相容性研究

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血栓形成和再狭窄等问题一直是介入治疗临床上亟待解决的难题。通过对支架材料进行表面改性,可增强材料的生物相容性。金属有机框架MOF(Mental Organic Framework)是由金属连接点和有机配体组装而成的新型配位材料,在催化和载药等领域有着广阔的前景。铜基MOF中的铜离子更是能够催化内源性一氧化氮供体释放一氧化氮(NO),但鲜有文献报道将此材料用于心血管材料表面修饰。本文在碱活化钛表面通过层层自组装的方法(LBL)制备了HKUST-1涂层(M10、M20、M30)。通过XRD、XPS、FTIR和SEM分析,证明HKUST-1涂层制备成功。将样品较大角度的折叠,SEM结果可证明涂层有较好的机械稳定性。NO释放检测结果显示NO释放速率与沉积层数成正比。正常内皮细胞释放NO速率范围为(0.5—4)×10-10 mol·cm-2·min-1,沉积10层的HKUST-1涂层(M10)催化释放NO的速率为(5.0±1.5)×10-10 mol·cm-2·min-1。分别将M10在含EDTA(500μM)的反应溶液中,含白蛋白(BSA 2 mg/ml)的PBS溶液中、细胞培养基(FBS 15%)中浸泡2 h之后进行NO催化测试,结果显示样品均能稳定释放NO,释放速率在正常内皮细胞的NO释放速率的范围内。血小板黏附实验结果显示M10有明显的抑制血小板黏附与激活的作用,半体内血液循环实验结果表明M10有优异的抗血栓性能,以上实验证明了M10有较好的血液相容性。在M10涂层表面静态培养内皮细胞(EC)、平滑肌细胞(SMC)、巨噬(MA)细胞,结果显示M10可促进EC,抑制SMC、MA细胞黏附与增殖的作用。利用过氧化氢(200μM)损伤EC模拟氧化应激状态,结果证明M10样品能够缓解过氧化氢造成的内皮细胞过氧化损伤。将M10涂层改性的钛丝植入大鼠腹主动脉,结果显示该涂层对内膜增生具有较好的抑制作用。在上文研究基础上,在多种基底PVC、316L、Ti-O材料表面沉积3层聚多巴胺(DM)作为连接层,采用LBL方法成功制备M10涂层。该涂层能稳定释放NO并能抑制血小板激活,进一步拓宽了HKUST-1涂层的适用范围。综上,本文通过层层自组装的方法可定性的调控样品表面的铜含量,以此可调控NO释放速率。体内与体外评价结果表明HKUST-1涂层通过铜离子催化释放的NO分子以及铜离子自身的生理作用结合,协同实现了抑制血小板黏附与激活、抗平滑肌增生,具有抗炎和促进内皮化的多重功能。
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