拮抗细菌控制小麦白粉病技术研究

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aiyang1983
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本文用本实验室筛选的小麦白粉病拮抗细菌菌系PE4和C27进行了较系统的研究,其研究内容包括拮抗细菌菌株的发酵条件分子鉴定温室和大田防效试验拮抗细菌的作用机制试验结果如下: 1.对两个拮抗细菌菌系PE4和C27的培养基种类进行了筛选,从5种培养基中筛选出了PE4和C27生长的最佳培养基种类,分别为NYBD培养基(牛肉浸膏8g,酵母浸膏5g,葡萄糖10g)和YSP培养基(酵母浸膏5g,蔗糖20g,蛋白胨10g)PB4和C27适宜生长的最佳碳源为蔗糖最佳氮源分别为牛肉浸膏和酵母浸膏蛋白胨和酵母浸膏。目B4适宜生长并产生抗菌物质的的最佳环境条件为:初始pH值为7,装液量20ml,接菌量30%,发酵时间48h,发酵温度24~28℃C27适宜生长并产生抗菌物质的最佳环境条件为;初始pH值为7,装液量120ml,接菌量30%,发酵时间24h,发酵温度32℃。 2.本试验在传统鉴定的基础上,对两个靶标拮抗细菌菌系进行了16S rRNA分子生物学方法的鉴定,PE4和C27的16S rRNA序列测定及与GenBank相似序列比对分析结果表明:两菌株均应为枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)。 3.拮抗细菌PE4和C27的温室和大田防效试验结果表明:在所设的4个处理中,菌药混用处理的防效最高,其次为发酵液,菌体无菌滤液在温室盆栽试验中,PE4和C27对小麦白粉病保护作用的防效要大于治疗作用在保护作用中,PE4和C27菌药混用处理的防效分别达到84.36%,72.68%,治疗作用中,PE4和C27菌药混用处理的防效分别达到73.24%,66.80%在田间小区试验中,PE4和C27菌药混用处理的防效分别为76.85%,64.89%PFA.菌株与C27菌株相比较,PE4菌株对小麦白粉病的防效大于C27菌株拮抗细菌对小麦白粉病的防效与化学农药腈菌唑相比,防效低于腈菌唑。 4.通过抗药性诱导获得了两个拮抗细菌菌株的抗Rf350μg/mL的诱导菌株并用于检测在小麦叶片的定殖能力拮抗细菌在小麦叶片的定殖与引进浓度接种小麦白粉病的时间有关,即接种的浓度越高,定殖时间越长,定殖的菌量也越大先喷施拮抗细菌后接种小麦白粉病菌要比拮抗细菌与小麦白粉病菌同时接种和先接种小麦白粉病菌后接种拮抗细菌影响小,这表明小麦白粉病菌与拮抗细菌间存在营养空间的竞争,也显示拮抗细菌在小麦白粉病发生前使用要比发生后使用效果好。拮抗细菌PE4可以诱导小麦植株体内的PPO,POD,PAL,SOD,CAT的酶活,MDA含量与对照相比差别不大。酶性的提高有利于植物提高自身的抗病性
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