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研究目的目前,针对三阴性乳腺癌(TNBC)有效的靶向治疗方案的研究仍然面临着巨大的挑战。在此,我们成功构建了一种细胞间粘附分子1(ICAM-1)抗体介导的药物传递系统用于TNBC靶向治疗。研究方法为了构建靶向药物递送体系[email protected],首先以CTAB为模版,通过溶胶凝胶法合成含有硫醚键的周期性介孔有机氧化硅(PMOs),并通过巯基和马来酰亚胺之间的点击反应将ICAM-1抗体分子和荧光染料Cy5.5修饰到PMOs纳米颗粒表面。接着将化疗药物DOX装载到PMO中间孔道中。经由TEM及DLS对PMOs表征;通过氮气吸附脱附实验验证PMOs孔径大小及比表面积,通过对水、上清液及PMO-Cy5.5的近红外荧光成像及[email protected]紫外-可见光吸收光谱的测试,测试并计算DOX的装载量,同时验证Cy5.5是否成功连接到PMOs表面;通过对PMOs、PMO-Cy5.5、PMO-Cy5.5-ICAM、[email protected]的Zeta电位的测量,验证Cy5.5和ICAM-1抗体是否已成功修饰到PMOs表面及DOX成功装载到PMOs孔道中;由MTT实验及小鼠活体实验验证PMO-Cy5.5-ICAM的生物相容性;通过共聚焦显微镜验证PMO-Cy5.5-ICAM纳米材料对三阴性乳腺癌细胞的靶向性;通过CCK-8实验,验证[email protected]对MDA-MB-231细胞的毒性;建立TNBC裸鼠模型,尾静脉注射DOX、PBS、[email protected]、[email protected]之后,离体近红外荧光成像,验证[email protected]在体内的分布情况;乳腺癌荷瘤鼠给药治疗30天后,通过测量肿瘤体积变化验证[email protected]对TNBC的治疗效果。实验中使用SPSS18.0软件进行数据的统计分析,采用t检验对定量数据进行比较,p<0.05代表有统计学差异。研究结果1、TEM图像显示,硫醚桥接的PMOs直径为70nm,拥有均匀的球形形状,在乙醇中的分散性良好,PMOs具有辐射状的介孔孔道,有利于药物分子的吸附和释放。动态光散射(DLS)得的PMOs水动力尺寸为90nm。PMOs的氮吸附等温线证明了其具有介孔结构。PMOs的表面积和孔径分别达到1146 m2/g和3.0 nm。2、PMOs-Cy5.5在近红外光学成像系统中显示出较强的荧光信号。此外,PMO-Cy5.5在紫外-可见光吸收光谱上表现出Cy5.5的特征吸收峰,这些结果都说明Cy5.5成功的修饰到PMOs上。[email protected]的红外光谱显示在1650 cm-1处的酰胺带,表明ICAM-1抗体被成功修饰到PMOs。Zeta电位的转变说明Cy5.5和ICAM-1抗体已成功修饰在PMOs上及DOX已被装载到PMOs孔道中。定量分析所得,PMO-Cy5.5-ICAM对阿霉素的装载能力高达400mg/g。3、体外MTT实验及小鼠活体实验结果表明,PMO-Cy5.5-ICAM展现出很好的体内生物相容性。激光共聚焦显微镜结果表明PMO-Cy5.5-ICAM能够有效的靶向并进入到TNBC细胞。药物释放实验表现出[email protected]明显的酸性pH敏感特征。细胞毒性实验表明[email protected]对MDA-MB-231细胞的杀伤作用高于其他对照组。离体近红外荧光成像,显示[email protected]在TNBC中积累量高于其他对照组。乳腺癌荷瘤鼠给药治疗30天后结果表明,[email protected]表现出对TNBC具有更好的治疗效果。结论本研究将ICAM-1抗体和Cy5.5结合到巯基桥联的PMOs上,制备了靶向ICAM-1给药系统用于TNBC的治疗。这是第一次基于ICAM-1靶向药物递送系统治疗三阴性乳腺癌的研究,为三阴性乳腺癌的治疗提供新思路。