苯并芘对肺泡Ⅱ型上皮细胞A549氧化应激的影响

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目的:研究不同浓度苯并芘(benzo(a)pyrene, B(a)P)对肺泡Ⅱ型上皮细胞A549氧化、抗氧化状态的影响,以及细胞抗氧化酶的变化规律,为探讨香烟烟雾中B(a)P对呼吸道上皮细胞的氧化损伤机制提供细胞毒理学的依据。方法:选用A549细胞株以模拟人肺泡Ⅱ型上皮细胞作为研究对象,采用0.1umol/L、1.0umol/L、10.0umol/LB(a)P持续处理A549细胞72小时,从蛋白水平检测MDA含量,TAC、总SOD、MnSOD、Cu/znSOD和CAT活性,再从RNA水平采用RT-PCR法验证MnSOD的表达情况。结果:A549细胞在B(a)P的处理下其MDA水平随着B(a)P的浓度升高而升高,并表现出明显的剂量效应关系;总SOD、MnSOD活性在0.1u mol/L处理组呈现明显的诱导效应,与对照组相比均有显著性差异(P<0.05),而在1.0u mol/L、10.0u mol/L处理组总SOD、MnSOD活性与对照组相比反而下降,差异有统计学意义(P<0.05);RNA水平测定MnSOD的表达情况,与蛋白水平检测结果一致;CAT活性随着B(a)P的浓度升高呈现逐渐增高的趋势,0.1u mol/L、1.0u mol/L、10.0u mol/L B(a)P浓度组与对照组相比分别提高了1.4、1.5和2.3倍(p<0.05),呈剂量效应性增高。结论:B(a)P可致A549细胞的脂质过氧化水平增高,且MDA水平与B(a)P的浓度呈正比,说明B(a)P浓度越高,细胞氧化损伤越重。在B(a)P的作用下细胞抗氧化酶发生适应性变化,TAC、CAT随着B(a)P浓度的上升而上调,总SOD、MnSOD活性有先增高后降低的趋势。
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