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丹参作为中药中常用大宗中药材,应用极广,能够在心脑血管等多种疾病治疗中起到良好疗效,市场需求量大。但是在中药材市场上,丹参的种质来源混乱,产地初加工及生产加工不一,对于丹参从种植、产地初加工到生产成品的过程中,没有统一规范化的标准进行指导,从而导致市场上的丹参质量不一,甚至出现大量不合格的丹参流通于市场。本文进行发汗与非发汗两种不同炮制工艺下丹参提取物在体内外对于P-gp影响的研究,旨在为丹参的产地初加工提供一定的科学依据。目的:本课题选取人肝癌HepG2细胞研究发汗与非发汗丹参提取物对HepG2细胞内P-gp功能及表达的影响研究,接着进行发汗与非发汗丹参提取物给药大鼠,研究其对大鼠体内肝、肠、脑、肾、心脏P-gp表达影响的研究。方法:体外实验中,MTT实验确定发汗与非发汗丹参总酚酸提取物和丹参酮提取物对于HepG2细胞的最佳给药浓度,接着通过Rho-123实验检测发汗与非发汗丹参提取物对HepG2细胞P-gp功能影响的研究,然后通过RT-PCR和Western blot法进行其发汗与非发汗丹参提取物对于P-gp的mRNA和蛋白表达影响的研究。体内实验,通过给药大鼠发汗与非发汗丹参提取物,采用RT-PCR和Western blot法进行其发汗与非发汗丹参总酚酸提取物和丹参酮提取物对于大鼠肝、肠、脑、肾、心脏P-gp表达影响的研究。结果:采用MTT实验确定发汗与非发汗丹参总酚酸提取物和丹参酮提取物对HepG2细胞的给药浓度:丹酚酸类提取物浓度为20、100、500μg/mL;丹参酮提取物浓度为2、10、50μg/mL。Rho-123实验检测发汗与非发汗丹参总酚酸提取物和丹参酮提取物对HepG2细胞P-gp功能的影响,积累和外排的实验结果表明发汗与非发汗丹参总酚酸提取物类20、100μg/mL对于HepG2细胞P-gp无影响,50μg/mL时有一定的诱导作用,且其发汗要比非发汗丹参总酚酸提取物诱导作用强;发汗与非发汗丹参酮提取物浓度2μg/mL对于HepG2细胞P-gp无影响,当浓度为10、50μg/mL对其HepG2细胞P-gp有抑制作用,且随着浓度的增加,抑制作用更强,同等浓度下其发汗要比非发汗丹参丹参酮提取物抑制作用更强。RT-PCR和Western blot实验结果与Rho-123实验结果基本一致。最后采用RT-PCR和Western blot法进行其发汗与非发汗丹参总酚酸提取物和丹参酮提取物对于大鼠肝、肠、脑、肾、心脏P-gp表达影响的研究,结果表明发汗与非发汗丹参总酚酸提取物对于大鼠肝、肠、脑、肾、心脏P-gp表达无影响,发汗与非发汗丹参酮提取物对于大鼠肝、肠、脑、肾P-gp表达有抑制作用,且发汗要比非发汗丹参丹参酮提取物抑制作用更强;但是对于心脏P-gp表达则无影响。结论:体内外实验表明发汗与非发汗丹参总酚酸提取物正常给药浓度对于其P-gp功能和表达无影响,提高浓度可能对于P-gp功能和表达有诱导作用,且发汗要比非发汗丹参总酚酸提取物诱导作用强。发汗与非发汗丹参酮提取物低浓度对于P-gp功能和表达无影响,正常给药浓度对其有抑制作用,随着浓度的增加,抑制作用更强,且发汗要比非发汗丹参酮提取物对P-gp抑制作用更强。本实验可为丹参的产地初加工提供一定的科学依据,且能够为丹参及其提取物联合使用其抗癌、抗肿瘤等多药耐药药物提供一定的理论基础。